Identifizierung intrazellulärer eukaryontischer Zielproteine von Yersinia enterocolitica Yop-Effektoren

人类致病性耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica，Y. pseudotuberculosis，Y. pestis）sowie anderer pathogener Bakterien schleusen über eine molekulare“Spritze”gezielt Effektorproteine in die Wirtszelle ein and beeinflussen dadvertiszelluläre Funktionen.在耶尔森氏菌中，发现了YopE、YopP/YopJ、YpkA/YopO、YopM、YopT和YopH等三型质粒介导的Sekretionsystems的有效蛋白质，并显示了它们的免疫学特征。最有效的真核细胞Ziel蛋白质的特异性并不明显。在真核细胞表达实验室中，我们必须使用双杂交系统和筛选方法，从Y.小肠结肠炎Yop-Effektorproteine（YopE，YopM，YopP，YopT，YpkA）在Wirtszellen aufgespürt韦尔登。通过对Zielproteine的鉴定，发现Zielproteine具有一种有效的功能特性，因此，微量蛋白质检测技术可应用于韦尔登的两个实验项目，即Y.小肠结石也要检查。

Die virulenzassoziierten Typ-III-Sekretionssysteme der humanpathogenen Yersinien (Yersinia enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Y. pestis) sowie anderer pathogener Bakterien schleusen über eine molekulare "Spritze" gezielt Effektorproteine in die Wirtszelle ein und beeinflussen dadurch zelluläre Funktionen. Bei den Yersinien wurden bisher sechs Effektorproteine des plasmidkodierten Typ-III-Sekretionssystems gefunden, YopE, YopP/YopJ, YpkA/YopO, YopM, YopT und YopH und ihre Wirkungsweise teilweise charakterisiert. Die spezifischen eukaryontischen Zielproteine der meisten dieser Effektorproteine sind bisher nicht bekannt.In den in diesem Antrag dargestellten Arbeiten sollen mit Hilfe von verschiedenen Methoden zum Nachweis von Protein-Protein-Wechselwirkungen ("Two-Hybrid"-Systeme und anderen Screeningmethoden) aus eukaryontischen Expressionsgenbanken die Interaktionspartner der Y. enterocolitica Yop-Effektorproteine (YopE, YopM, YopP, YopT, YpkA) in Wirtszellen aufgespürt werden. Ausgehend von der Identifizierung entsprechender Zielproteine soll sich eine weitere funktionelle Charakterisierung der Effektorproteine anschließen.Durch mikroskopische Techniken soll in einem zweiten Teilprojekt der geplanten Arbeiten versucht werden, die Struktur des virulenzassoziierten Typ-III-Sekretionsapparat von Y. enterolitica näher zu untersuchen.