Genom-weite Analyse von RING-Finger-Proteinen der Hefe Saccharomyces cerevisiae

基于泛素-蛋白酶体系统的细胞选择性蛋白质降解研究[j]；【关键词】酶催化，E1-, E2-， e3 -酶催化，酶解蛋白，酶解蛋白，酶解蛋白，酶解蛋白，酶解蛋白；Die Spezifität dieses Vorgangs wid durch E3-Ubiquitin-Ligasen, Die Substrate erkennen and ubiquitinieren, controlliert。Einigen dieser E3-Ubiquitin-Ligasen ist eine hochkonservierte, zink - complex ierende, sogenannte RING-Finger Domäne gemeinsam, die in hunderten von hypothetischen protein aller Eukaryonten gefunden wid。In meiner Arbeit soll die zelluläre无名指蛋白的功能与研究，引用本文：mass - spectre interaktionpartner bzw。gebundene底物鉴定方法，采用hilife der dna - chip - technology技术，构建了ring - finger - deletionsmutant基因表达图谱，并建立了hilife - iner Deletionsgenbank，合成了ring - finger - deletionsmutant基因图谱。Die Ergebnisse dieser primären分析sollen mittelels verschiedener生化师Ansätze wie e3 -泛素连接酶的重组Aktivität mit rekombinanten Proteinen bestätigt和ergänzt werden。

Die selektive Proteindegradation durch das Ubiquitin-Proteasom-System ist verantwortlich für die Regulation verschiedener zellulärer Prozesse. Durch die kovalente Bindung von Ubiquitinketten, die durch eine Enzymkaskade bestehend aus E1-, E2- und E3-Enzymen katalysiert wird, werden Zielproteine dieses Proteolysewegs für den Abbau markiert. Die Spezifität dieses Vorgangs wird durch E3-Ubiquitin-Ligasen, die Substrate erkennen und ubiquitinieren, kontrolliert. Einigen dieser E3-Ubiquitin-Ligasen ist eine hochkonservierte, Zink-komplexierende, sogenannte RING-Finger Domäne gemeinsam, die in hunderten von hypothetischen Proteinen aller Eukaryonten gefunden wird. In meiner Arbeit soll die zelluläre Funktion von unbekannten Hefe-RING-Finger Proteinen untersucht werden, indem mittels Massenspektrometrie Interaktionspartner bzw. gebundene Substrate identifiziert werden, mit Hilfe der DNA-Chip-Technologie Genexpressionsprofile von RING-Finger-Deletionsmutanten erstellt werden und mit Hilfe einer Deletionsgenbank nach synthetisch letalen Interaktionen mit RING-Finger-Deletionsmutanten gesucht wird. Die Ergebnisse dieser primären Analyse sollen mittels verschiedener biochemischer Ansätze wie Rekonstitution der E3-Ubiquitin-Ligase Aktivität mit rekombinanten Proteinen bestätigt und ergänzt werden.