Molekülstruktur und Mechanismus der Filamentbildung zytoplasmatischer Intermediärfilament-Proteine aus normalen und pathologisch veränderten Zellen

Aufgrund ihres vorkommenens和ihrer bibiophysikalischen Eigenschaften gelten Intermediärfilamente （IFs）也die entscheidenden Träger zellulärer Stabilität differenzierter vertebrenzellen。Die Bildung der IFs aus ihren untereheiten，“卷曲的线圈”-Komplexen zweier -helikaler多肽，1 bisher nur unvollständig geklärt。Da die unschiedlichen zytoplasmatihen IFs einem gemeinsamen Grundbauplan folgen and auch entscheidende Phasen des“Assembly”nach den gleichen Prinzipien ablaufen, hach den gleichen Prinzipien ablaufen, hach den gleichen Prinzipien ablaufen, die molecular aren Bedingungen fr . die filament biltending and human Vimentin, einem homoolimerbildenden IF-Protein aufzuklären。在unfangreichen Vorarbeiten hair gegeheight， daß von diesen coil- coil- proteinen， wenn晚上在Ganzen，所以doch von Teilen， Kristalle erhalten和deren Atomstrukturen mittel Röntgenbeugung gelöst werden können。晶体化<s:1>缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸Domänen缩氨酸-缩氨酸-缩氨酸。Die Aufklärung der von den nicht-a-helikalen Domänen ausgehenden Wechselwirkungen ist Die voraussesetzung, Die dynamischen atomaren Umlagerungen während des in mehren unterscheidbaren Stufen ablaufenden filamentbildgsproesses zu versteen。细胞质质与if -蛋白之间的相互作用与相互作用。Ziel等，if - protein的Folgen erblicher Mutationen， weisie z.B.在心肌病中，表皮松解和神经细胞，Erkrankungen gefunden werden, [r] die function der if - molecular zu erklären。该大分子“组装”soll mit Hilfe von geeigneten if - protein - peptide in Detail aufgeklärt werden， and zwar in den bewährten在体外，systemen sowie在体内，在Zellen中进行微孔注射，die mit grif - nem荧光蛋白-markiertem Vimentin稳定传递。

Aufgrund ihres Vorkommens und ihrer biophysikalischen Eigenschaften gelten Intermediärfilamente (IFs) als die entscheidenden Träger zellulärer Stabilität differenzierter Vertebratenzellen. Die Bildung der IFs aus ihren Untereinheiten, "coiledcoil"-Komplexen zweier a-helikaler Polypeptide, ist bisher nur unvollständig geklärt. Da die unterschiedlichen zytoplasmatischen IFs einem gemeinsamen Grundbauplan folgen und auch entscheidende Phasen des "Assembly" nach den gleichen Prinzipien ablaufen, haben wir uns entschlossen, die molekularen Bedingungen für die Filamentbildung an humanem Vimentin, einem homopolymerbildenden IF-Protein aufzuklären. In umfangreichen Vorarbeiten haben wir gezeigt, daß von diesen coiled-coil-Proteinen, wenn nicht im Ganzen, so doch von Teilen, Kristalle erhalten und deren Atomstrukturen mittels Röntgenbeugung gelöst werden können. Die gesamte Struktur soll nun durch die Kristallisation überlappender Peptide, im besonderen der nicht-a-helikalen Domänen abgeschlossen werden. Die Aufklärung der von den nicht-a-helikalen Domänen ausgehenden Wechselwirkungen ist die Voraussetzung, die dynamischen atomaren Umlagerungen während des in mehreren unterscheidbaren Stufen ablaufenden Filamentbildungsprozesses zu verstehen. Die hieraus gewonnenen Erkenntnisse sollen sodann auf die Bildung und Wirkungsweise der anderen cytoplasmatischen IF-Proteine angewandt werden. Ziel ist es, die Folgen erblicher Mutationen in IF-Proteinen, wie sie z.B. in Cardiomyopathien, epidermolytischen und neuralen Erkrankungen gefunden werden, für die Funktion der IFs molekular zu erklären. Dieses makromolekulare "Assembly" soll mit Hilfe von geeigneten IF-Protein-Peptiden im Detail aufgeklärt werden, und zwar in den bewährten in vitro-Systemen sowie in vivo durch Mikroinjektion in Zellen, die mit grünem fluoreszierenden Protein-markiertem Vimentin stabil transfiziert sind.