Investigation of structure and function of the COPI-System using single, on nanostructures immobilised molecules and fluorescence resonance energy transfer (FRET)

Ziel der Interdisziplinären Projektist die Aufklärung der StrukTurn-Funktions-Zusammenhänge einer Bio-Molekularen Maschine am Beispiel des Transportvesikels COPI.该系统是一种理想的转基因植物，供体为供体，供体为生物化学的供体，生物化学在7个国家的生物化学基础上进行了转化和转化。Lät t.Während der print zipielle Machismus in COPI-Vesikel-Abschnürung im Detail augeglärt wurde，ist Wigigur Architur Archituk and Dynamur ik der StrukkTures Cotom Sowzie Transportgn abgnürter Vesibauen Steuen Steuen.Zur Strukturaufklärung soll in beantragten Projekt der Flureszenz-Resonanz-Energie-Transfer(FRET)auf Einzelmolekülebene(Single-Pair，spFRET)eingesetzt deingesetzt.HERZU Sollen verschiedene Kombinationen von Untereinheiten des Coom er-Komplexes gezielt MIT Farbstoffen markiert and aufgrund bstimten捐赠者/Akzeptor-Abstände ein 3D-Model des Coaotomer erstellt beden.在实验过程中，我们发现了一种新型的纳米结构材料，即MIT Einer ZeitauflöSong im和MIT einer ZeitauflöSong imµS女士。从GFP-Markierer COPI-Vesikel BZW开始，我们将继续进行绿色荧光成像技术研究和实践。

Ziel der interdisziplinären Projektinitiative ist die Aufklärung der Struktur-Funktions-Zusammenhänge einer Bio-Molekularen Maschine am Beispiel des Transportvesikels COPI. Das COPI-System ist ideal für die geplanten Untersuchungen geeignet, da sich das Coatomer für eine spezifische Markierung mit Donor- und Akzeptorfarbstoffen biochemisch in seine 7 Untereinheiten zerlegen und reversibel wieder zu einem funktionierenden Coatomer zusammenbauen läßt. Während der prinzipielle Mechanismus der COPI-Vesikel-Abschnürung im Detail aufgeklärt wurde, ist wenig zur Architektur und Dynamik der Struktur des Coatomers sowie zum Transportweg abgeschnürter Vesikel und dessen Steuerung in vivo bekannt. Zur Strukturaufklärung soll im beantragten Projekt der Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (FRET) auf Einzelmolekülebene (single-pair, spFRET) eingesetzt werden. Hierzu sollen verschiedene Kombinationen von Untereinheiten des Coatomer-Komplexes gezielt mit Farbstoffen markiert und aufgrund der bestimmten Donor/Akzeptor-Abstände ein 3D-Model des Coaotomer erstellt werden. Die Dynamik der intramolekularen Abstände und deren Veränderung bei Anbindung von Rezeptoren soll durch Experimente an einzelnen Coatomer-Molekülen, die auf einer Nanostruktur fixiert sind, mit einer Zeitauflösung im µs-ms Bereich aufgeklärt werden. Es soll die Richtungssteuerung durch das zeitaufgelöste Fluoreszenz-Imaging einzelner farbstoff- oder GFP-markierter COPI-Vesikel bzw. Coatomere in lebenden Zellen studiert und verstanden werden.