Prodrug Ganciclovir Activation after Tumor-Specific In Vivo Transfection with HSV-1 Thymidine Kinase Gene Using a Sindbis Viral Vector: Evaluation by functional and morphological imaging

Kürzlich证明Ergebnisse konten zeigen，davonitmit Vektoren des Alphavirus Sindbis die Möglichkeit besteht，Tumorzellen in vivo spezifisch und systemisch zu infizieren 1，2. Sindbis Vektoren的肿瘤特异性将与67-kDa层粘连蛋白受体（LAMR）3密切相关，并可在一个Vielzahl中检测人类肿瘤特异性4，5，6，7。Sindbis Vektoren的转基因可以在细胞内转表达自杀基因，这是一种韦尔登基因，也是一种编码酶的合成酶。转化为前药。Diese Eigenschaft schafft die Voraussetzung infizierte Tumorzellen einer“gene-directed enzyme-promoter therapy”（GDEPT）zuzuführen und nicht-neoplastisches Gewebe zu schonen 1，2.肿瘤GDEPT中最好的酶/前药系统是单纯疱疹病毒胸苷激酶1型/更昔洛韦（HSVtk/GCV）系统11。它对肿瘤的早期诊断非常有效，因为它抑制DNA聚合酶，并能有效地预防肿瘤的发生。Langsam proliferierendes Gewebe hingegen bleibt verschont 12，13，14. Neben ihrer breiten Tumorreaktivität besteht ein weiterer wichtiger Vorteil der Sindbis Vektoren in der Krebsttherapie，davidas native Virus selbst eine Apoptose in Säugetierzellen induzieren kann8，9，10. Um diese therapeutische Funktion zu verstärken und mögliche Toxizität gegenüber nichtberen Zellen zu verringern würde die Möglichkeit zur Bestimmung des Ausmaßes der Expression von“suicide gentherapie Vektoren die GDPT deutlich verbessern.正电子发射断层扫描（PET）示踪剂124 IFIAU和18 F-FEAU，作为放射性标记的胸苷类似物，可用于评估HSVtk在活体组织中的活性15、16，并对HSVtk/GCV GDEPT的治疗效果进行验证和评价。该研究包括体外和体内辛德比斯病毒转染人肿瘤的优化，层粘连蛋白受体表达在病毒转染中的作用的特异性评估，以及通过微PET（microPET）和形态学（microCT，Kleintier-MRT）模式对治疗效果的定量研究。

Kürzlich publizierte Ergebnisse konnten zeigen, daß mit Vektoren des Alphavirus Sindbis die Möglichkeit besteht, Tumorzellen in vivo spezifisch und systemisch zu infizieren1, 2. Die Tumorspezifität der Sindbis Vektoren wird vermittelt über den hoch affinen 67-kDa Laminin Rezeptor (LAMR)3, welcher in einer Vielzahl verschiedener humaner Tumoren überexprimiert wird4, 5, 6, 7. Über die Transfektion von Sindbis Vektoren kann intrazellulär die Expression transduzierter ‚suicide genes’ vermittelt werden, welche die Synthese von Enzymen codieren und somit z.B. die Konversion eines Prodrug ermöglichen. Diese Eigenschaft schafft die Voraussetzung infizierte Tumorzellen einer ‚gene-directed enzyme-prodrug therapy’ (GDEPT) zuzuführen und nicht-neoplastisches Gewebe zu schonen1, 2. Eine der am besten untersuchten Enzym/Prodrug Systeme in der GDEPT von Tumoren ist das Herpes Simplex Virus Thymidin Kinase Typ 1/Ganciclovir (HSVtk/GCV) System11. Es ist hoch effektiv im Einsatz gegen schnell wachsende Tumorzellen, indem es deren DNAPolymerase inhibiert und im weiteren einen Zelluntergang hervorruft. Langsam proliferierendes Gewebe hingegen bleibt verschont12, 13, 14. Neben ihrer breiten Tumorreaktivität besteht ein weiterer wichtiger Vorteil der Sindbis Vektoren in der Krebstherapie, daß das native Virus selbst eine Apoptose in Säugetierzellen induzieren kann8, 9, 10. Um diese therapeutische Funktion zu verstärken und mögliche Toxizität gegenüber nichtmalignen Zellen zu verringern würde die Möglichkeit zur Bestimmung des Ausmaßes der Expression von ‚suicide genes’ in Patienten nach Verabreichung der Gentherapie Vektoren die GDPT deutlich verbessern. Positronen Emissions Tomographie (PET) tracer wie 124IFIAU und 18F-FEAU, als radioaktiv gelabelte Thymidin Analoga, wurden bereits entwickelt, um die HSVtk Aktivität in lebenden Organismen zu bestimmen15, 16 und somit das Verfolgen und Evaluieren des therapeutischen Effektes der HSVtk/GCV GDEPT zu ermöglichen. Die Ziele dieser Studie beinhalten die Optimierung der Sindbis Virus-vermittelten Transfektion verschiedener humaner Tumorzelllinien in vitro und in vivo, die spezifische Rolle der Laminin Rezeptor-Expression bei der Virus Transfektion zu bestimmen und diese Abläufe darzustellen und zu quantifizieren inklusiver ihrer therapeutischen Effekte durch den Einsatz kombinierter funktioneller (microPET) und morphologischer (microCT, Kleintier-MRT) Modalitäten.