Novel neurovascular protective mechanisms of PEDF after subarachnoid hemorrhage

摘要 动脉瘤性蛛网膜下腔出血（SAH）是一种破坏性的出血性卒中， 存活患者的死亡率和长期发病率。1 - 2004最近，SAH研究的重点已经转移 早期脑损伤（EBI）包括SAH后的急性初始事件，如颅内压升高， 颅内压（ICP），全脑缺血，血脑屏障（BBB）破坏，脑水肿形成，神经元 细胞凋亡，炎症和细胞死亡途径的激活，导致延迟的神经 恶化，导致SAH后的死亡率和发病率。 色素上皮衍生因子（PEDF）是一种多能性糖蛋白， 包括大脑。9，14 PEDF减少了各种类型细胞的凋亡，包括神经元，14，18成骨细胞24 22同样，PEDF减少了眼科手术中的血管通透性和黄斑水肿。 37，41关于PEDF在卒中后的作用的研究相对有限。 PEDF已 已显示对体外神经元细胞存活具有保护作用14，18，并减弱脑缺血 PEDF减少了寒冷诱导的损伤后的脑水肿和短暂的脑水肿。 然而，PEDF在SAH后的作用尚未被探索。 此外，PEDF的神经血管保护机制尚未研究。 这项建议会 通过抗凋亡和血脑屏障的作用，阐明PEDF的神经血管保护机制 啮齿动物血管内穿孔SAH模型中的保护途径。我们将依次确定 内源性PEDF的作用，然后评估鼻内给药的治疗效果， 重组PEDF抗SAH后早期脑损伤，特别是神经元凋亡和BBB破坏， 被评价。 此外，我们还将阐明PEDF受体（PEDF-BXR）的下游信号通路. PEDF的抗肿瘤凋亡和血脑屏障保护机制。我们建议PEDF将启动 鼻内重组PEDF减少神经元凋亡的PEDF-miR/NPD 1/Erk 1/2-miR-1通路 局 此外，PEDF激活PEDF-12 R/Nrf 2/HO-121通路将有助于BBB稳定 SAH后。我们将通过敲低PEDF受体并抑制其通路来阐明PEDF-β受体的作用机制 信号通路介导的保护。 总之，这一建议将提供新的见解PEDF的神经血管保护机制。 此外，该建议将确立鼻内给予PEDF作为一种免疫抑制剂的保护功效。 SAH后早期脑损伤的潜在治疗靶点。

ABSTRACT  Aneurysmal  subarachnoid  hemorrhage  (SAH)  is  a  devastating  type  of  hemorrhagic  stroke  with  50%  mortality and long-­term morbidity in surviving patients.1-­4 Recently, the focus of SAH research has been shifted  to early brain  injury  (EBI)  which  comprises the acute  initial  events after  SAH,  such  as  elevation  of  intracranial  pressure  (ICP),  global  ischemia,  blood  brain  barrier  (BBB)  disruption,  brain  edema  formation,  neuronal  apoptosis,  activation  of  inflammatory  and  cell  death  pathways  that  contribute  to  delayed  neurological  deterioration, leading to mortality and morbidity after SAH.5-­8  Pigment-­epithelium  derived  factor  (PEDF)  is  a  pluripotent  glycoprotein  expressed  in  various  tissues  including  the  brain.9,14  PEDF  reduced  apoptosis  in  various  types  of  cells  including  neurons,14,18  osteoblasts24  and  cardiomyocytes.22  Likewise,  PEDF  reduced  vascular  permeability  and  macular  edema  in  ophthalmologic  pathologies.37,41  There  have  been  relatively  limited  studies  on  the  role  of  PEDF  following  stroke.  PEDF  has  been  shown  to  have  protective  effects  on  neuronal  cell  survival  in  vitro14,18  and  attenuated  cerebral  ischemic  injury  in  rodent  models.19-­21  PEDF  reduced  brain  edema  following  cold-­induced  injury  and  transient  cerebral  ischemia  in  rodent  models.20,21,42  However,  the  role  of  PEDF  following  SAH  has  not  been  explored.  Furthermore,  the  neurovascular  protective  mechanisms  of  PEDF  have  not  been  studied.  This  proposal  will  elucidate  the  neurovascular  protective  mechanisms  of  PEDF  through  anti-­apoptotic  and  BBB  protective pathways in a rodent endovascular perforation SAH model. We will sequentially determine the  role  of  endogenous  PEDF  and  then  evaluate  the  therapeutic  benefits  of  intranasal  administration  of  recombinant PEDF against early brain injury after SAH, specifically neuronal apoptosis and BBB disruption will  be  evaluated.  Additionally,  we  will  elucidate  the  downstream  signaling  pathways  of  PEDF  receptor  (PEDF-­R)  that contribute to anti-­apoptotic and BBB protective mechanisms of PEDF. We propose that PEDF will activate  PEDF-­R/NPD1/Erk1/2-­cRel  pathway  that  reduces  neuronal  apoptosis  with  intranasal  recombinant  PEDF  administration.  Also,  PEDF  activation  of  the  PEDF-­R/Nrf2/HO-­1  pathway  will  contribute  to  BBB  stabilization  after SAH. We will knockdown PEDF receptor and inhibit the pathways to elucidate the mechanism of PEDF-­R  signaling pathway mediated protection.    Overall,  this  proposal  will  provide  novel  insights  into  neurovascular  protective  mechanisms  of  PEDF.  Additionally,  this  proposal  will  establish  the  protective  efficacy  of  intranasal  administration  of  PEDF  as  a  potential therapeutic target against early brain injury after SAH.