Direct molecular detection of DNA for blood genotyping

仅在魁北克省，每年的输血量就超过25万单位。为了向医院提供安全的血液，血库设施必须检测每个献血者和受血者是否存在几种红细胞抗原。由于人口老龄化、输血次数不断增加以及目前用于检测这些抗原的现有技术的复杂性和样品吞吐量有限，配型血液的采购成为血库日益严重的业务问题。本文提出的项目目的是利用我们研究小组最近展示的一种称为荧光链反应（FCR）的分子传感方案，开发一种快速简便的血液基因型鉴定方法。这种新的检测方案结合了特异性寡核苷酸探针和光学聚合物传感器，能够在5分钟内检测到5个拷贝的遗传物质，并具有区分单核苷酸多态性所需的特异性。这种检测能力比目前正在开发的任何其他方法都要高出几个数量级，有可能在浓度水平上提供快速、可靠和负担得起的分子分型程序，从而不再需要事先的化学扩增或标记。该研究项目将侧重于提高FCR对实验条件变化的特异性和稳健性，以及对在献血者和受体临床相关抗原基因分型中发现的具有代表性的样品组成。通过本提案中所述的研究和实验继续发展这项技术，将对生物技术/生物医学部门和公共卫生问题产生巨大影响，我们认为，包括我们的合作伙伴Hema-Quebec在内的各个领域的科学家和企业将从这项技术中大大受益。加上25万单位的薪金，即薪金，薪金，薪金，薪金，薪金，薪金，薪金，薪金，薪金。在对产品进行抽样调查后，在对产品进行抽样调查后，在对产品进行抽样调查后，在对产品进行抽样调查后，在对产品进行抽样调查后，在对产品进行抽样调查后，在对胭脂球进行抽样调查后。À cause du vieillisement de la population, du nombre croissant de patients transfussians and de cadence analytique insuffisante de la technology actuelement disables, la la disposition des hôpitaux d' unitedsames de sang兼容的sames和sames ciendaires reresames UN samis granddisant pour les banques de sang。该项目采用了基于荧光链式反应原理（FCR）的<s:1>电子烟和化学烟和化学烟和化学烟和化学烟和化学烟和化学烟。一种新的方法结合了des des sondes d'ADN和传感器光学聚合物，在5分钟内检测出5个d'ADN ssamcience d'ADN donacimique拷贝，每一个ssamcience都能检测出ssamcience des polymorphismes和ssuide Nucleotide Polymorphism （SNP）。一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”，一种叫“惩罚”的，一种叫“惩罚”的，一种叫“惩罚”的。该研究项目的主要内容是：在不同的条件下进行实验，在不同的条件下进行模拟，在不同的条件下进行模拟，在不同的条件下进行模拟，在不同的条件下进行模拟，在不同的条件下进行模拟，在不同的条件下进行模拟。关于FCR的信息，关于拟议的和需要的，关于生物技术的信息，关于生物技术的信息，关于生物技术的信息，关于公共的信息，关于科学的信息，关于科学和工业的信息，关于各种活动领域的信息，包括关于合作伙伴的信息，关于FCR的信息

More than 250,000 blood units are transfused each year in the province of Quebec alone. In order to provide safe blood to hospitals, blood bank facilities must test every donor and recipient for the presence of several red cell antigens. Because of population aging, of the increasing number of transfusions and of the complexity and limited sample throughput of currently available technology used to test for these antigens, the procurement of matched blood represents a growing operational problem for blood banks. The purpose of the project proposed herein is to develop a rapid and simple method for the identification of blood genotypes using a molecular sensing scheme called Fluorescence Chain Reaction (FCR) recently demonstrated by our research team. This novel detection scheme combines specific oligonucleotide probes and an optical polymeric transducer and is able to detect as little as 5 copies of genetic material in 5 minutes with the specificity required to distinguish single nucleotide polymorphisms. Such as detection capability, which is several orders of magnitude ahead of any other approach currently in development, has the potential to provide fast, reliable and affordable molecular typing procedures at concentration levels such that prior chemical amplification or tagging will no longer be necessary. This research project will focus on increasing FCR's specificity and robustness towards variations in experimental conditions and for sample compositions that are representative of those found in the genotyping of clinically relevant antigens of blood donors and recipients. Continued development of this technology through the studies and experiments described in the present proposal will have a massive impact in the biotechnology/biomedical sectors and on public health issues, and we believe that scientists and industries in various fields, including our partner Hema-Quebec, will greatly benefit from this technology.Plus de 250 000 unités de sang sont transfusées chaque année dans la seule province de Québec. Afin de pouvoir fournir un produit sécuritaire aux hôpitaux, les banques de sang doivent tester chaque donneur et chaque récipiendaire pour la présence de plusieurs antigènes de globules rouges. À cause du vieillissement de la population, du nombre croissant de patients transfusés et de la cadence analytique insuffisante de la technologie actuellement disponible, la mise à la disposition des hôpitaux d'unités de sang compatible avec les récipiendaires représente un défi grandissant pour les banques de sang. Ce projet vise le développement d'une méthode rapide et simple pour le génotypage sanguin basée sur le principe de Fluorescence Chain Reaction (FCR) démontré récemment par notre équipe de recherche. Cette nouvelle approche combine des sondes d'ADN et un transducteur optique à polymère, et est capable de détecter aussi peu que 5 copies d'une séquence d'ADN donnée en 5 minutes, avec une spécificité apte à distinguer des polymorphismes à un seul acide nucléique (Single Nucleotide Polymorphism, SNP). Une telle puissance de détection, surpassant de plusieurs ordres de grandeur toutes les autres approches actuellement disponibles ou en cours de développement, laisse entrevoir la possibilité de méthodes de typage moléculaire rapides, fiables et abordables, et à des niveaux de concentration tels que l'amplification ou le marquage chimiques ne seront désormais plus nécessaires. Ce projet de recherche ciblera l'augmentation de la spécificité et de la robustesse du FCR face à des variations des conditions expérimentales et pour des matrices d'échantillons complexes du type de celles rencontrées lors de l'identification d'antigènes dans des échantillons sanguins destinés aux transfusions. La poursuite du développement du FCR, tel que proposée dans la présente demande, aura un impact considérable sur la biotechnologie, les sciences biomédicales et sur la santé publique, et nous croyons que les scientifiques et les industries de diverses sphères d'activités, incluant notre partenaire Héma-Québec, pour