Régulations et fonctions de l'endonucléase DFF chez les cellules saines et en apoptoses

L'estertose est nécessaire Au décessaire et Au maintien du bon functionnement de tout organisme vivant.在最后一段时间里，北方民族解放军分裂，民兵组织形成。DFF（DNA片段化因子）是细胞凋亡中隐含的主要内切酶。DFF存在于细胞质中，形成了一个分子量为45 kDa的分子伴侣（DFF 45）和一个分子量为40 kDa的潜在单核苷酸内切酶（DFF 40）。我们的工作允许caspase-3存在于调节DFF 40活性的多种机制中。控制核辐射的要点需要研究和提出一种防止国防部部队发生意外激活的方法。该研究方案的目标是明确说明DFF在ADN lors de l 'ADN l' AD法庭泰尔梅的目的是：I）确定DFF在增殖和消化过程中的细胞单位的转化后变化，II）确定转化后变化中的酶和信号传导途径，III）确定DFF的其他生理功能。Lignées de cellules lymphoïdes et neuronales susceptibles or résistantes à la fragmentation de l'ADN seront utilisées.在一个首要的时间，l 'importance des post-transductionnels des sous-unités des DFF unités post-transductionnels dans la régulation des événements nucléaires impliqués dans l' administration sera determinée.通过对细胞增殖或糖代谢过程中细胞组分和细胞核的分析，我们确定了DFF 45和DFF 40上磷酸化、乙酰化或O-糖基化的存在。根据获得的结果，这些致突变的实验表明，这些修饰在翻译后对该内切核酸酶活性的重要性。II）某些蛋白的转化后变化的相关生物化学途径的激活可代表DFF活性控制的另一个新途径。由于在两种细胞模型中的自然相对物中没有核辐射，我们建议对细胞信号化的途径进行比较分析。Ce dernier type d'analyze nous permettra d'associer les modifications de certaines voies signalétiques et l'absence d'australtose nucléaire. III）确定DFF在其他生理功能中的作用。我们建议确定DFF 40在细胞分化中的重要性以及确定其在Au niveAu线粒体中的重要性。该研究项目对于理解核辐射和DFF蛋白的功能具有重要意义。

L’apoptose est nécessaire au développement et au maintien du bon fonctionnement de tout organisme vivant. Dans l’étape finale de l’apoptose, il y a fragmentation de l’ADN et formation de corps apoptotiques. Le DFF (DNA fragmentation factor) est la principale endonucléase impliquée dans l’apoptose. Le DFF réside dans le noyau ou le cytoplasme sous forme d’hétérodimère composé d’une chaperonne de 45 kDa (DFF45) à activité inhibitrice et d’une sous unité endonucléase latente de 40 kDa (DFF40). Nos travaux ont permis d’établir qu’il existe en aval de la caspase-3 un ou plusieurs mécanismes de régulation de l’activité du DFF40. Ce point de contrôle de l’apoptose nucléaire est peu étudié et représenterait un moyen de protection contre une activation accidentelle du DFF. L’objectif de ce programme de recherche est de caractériser comment est régulée l’endonucléase DFF impliquée dans la fragmentation de l’ADN lors de l’apoptose. Les objectifs à court terme sont : I) de caractériser les changements post-traductionnels que subissent les sous-unités du DFF chez les cellules en prolifération et en apoptose, II) de déterminer les enzymes et voies de signalisation impliquées dans les modifications post-traductionnelles, III) d'établir d'autres fonctions physiologiques du DFF. Des lignées de cellules lymphoïdes et neuronales susceptibles ou résistantes à la fragmentation de l’ADN seront utilisées. Dans un premier temps, l’importance des changements post-traductionnels des sous-unités du DFF dans la régulation des événements nucléaires impliqués dans l’apoptose sera déterminée. À partir de fractions cellulaires et nucléaires obtenues de cellule en prolifération ou en état d’apoptose, nous déterminerons la présence de résidus phosphorylés ou acétylés ou O-glycosylés sur le DFF45 et le DFF40. Selon les résultats obtenus, des expériences de mutagenèse dirigée seront utilisées afin de cibler l’importance de ces modifications post-traductionnelles sur l’activité de cette endonucléase. II) L’activation des voies biochimiques associées à des changements post-traductionnels de certaines protéines peut représenter un autre niveau de contrôle de l’activité du DFF. Tirant profit de l’absence d’apoptose nucléaire dans les révertants naturels dans nos deux modèles cellulaires, nous proposons une analyse comparative des voies de signalisation cellulaire. Ce dernier type d’analyse nous permettra d’associer les modifications de certaines voies signalétiques et l’absence d’apoptose nucléaire. III) Déterminer le rôle du  DFF dans d'autres fonctions physiologiques. Nous proposons de déterminer l’importance du DFF40 dans la différenciation cellulaire et de déterminer son importance au niveau mitochondrial. Ce projet de recherche a une importance cruciale afin de comprendre l’apoptose nucléaire et les fonctions de la protéine DFF.