Bioaérosols nanométriques et aérovirologie

生物气溶胶是由存在于空气中的生物固体颗粒和生物有机体组成的。De formes et grosseurs variables（1 à 100 microns）ils sont constitués de fragments contant des moisissures，bactéries，virus.生物气溶胶的纳米部分还不值得研究。他们对多种传染性疾病（结核病、淋巴结炎、流行性感冒）或炎症（过敏性哮喘、过敏性肺泡炎）负责。生物气溶胶的研究主要涉及到微尺度的气溶胶颗粒，但研究中所使用的方法大多不能对纳米尺度的气溶胶进行捕获和分析。这些纳米气溶胶可能含有细菌或真菌的片段，可以保存一种潜在的免疫原或免疫原。Des données préliminaires nous montrent que les bioaérosols nanométriques peuvent contenir des particules virales 'viables' et parfois même plus d'une par particule d'aérosol.由于方法学和仪器的局限性，人们对纳米气溶胶上存在的病毒感染性的认识不足。La quasi-totalité des études s'étant attardées aux particules nanométriques ont été effectuées dans une optique de pollution chimique et particulaire de l'air.Le programme de recherche proposé a pour objectifs principaux 1）de décrire la charge virale portée sur différentes tailles d'aérosols，2）评价单、多气溶胶的动态变化3）在不同的气溶胶颗粒上的病毒颗粒的完整性的评价。此外，4）研究水净化过程中空气的传播机理，（噬菌体、单叠氮丙啶、三氟甲基吡啶）（CRSNG CHRP）ou acquis récement（FCI，MDEIE）afin d'amasser des données sur un sujet pour lequel，il n'existe que très peu de littérature.A l'aide d'un échantillonneur Electric Low Pression Impactor（FCI），我们提出了一种渗透于6 nm至10µm区间内的气溶胶浓度和含量的定量方法，récupérer les différentes fractions et effectuer des analyses moléculaires pour y quantifier la charge virale.通过研究不同气溶胶参数对生物气溶胶的影响，在气溶胶的浓度变化和气溶胶的浓度变化方面，研究了气溶胶的气溶胶化和气溶胶的成熟。Des modèles de virus utilisant des bactériophages ont été déceppés（CRSNG/IRSC PRCS）permettant de modéliser les aérosols virraux infantieux sans constraintes de confinement. Nous utiliserons ces modèles afin de générer des aérosols mono-et poly-dispersés dans notre tamphetrotif.气溶胶一般在不同的条件下产生的颗粒物和浓度的变化是通过空气动力学粒度仪和扫描流动性粒度仪进行观测的，并对ELPI的技术有很大的帮助。我们使用单叠氮丙啶（MAP）渗透剂的显色方法，通过适用于病毒细菌的qPCR，评估微生物的比例。在人类展示的背景下，病毒方法学是一项重要的研究。

Les bioaérosols se définissent comme des particules biologiques solides présentent dans l’air et issus d’organismes biologiques. De formes et grosseurs variables (1 à 100 microns) ils sont constitués de fragments contenant des moisissures, bactéries, virus. La portion nanométrique des bioaérosols n’a été que peu étudiée. Ils sont responsables de plusieurs maladies infectieuses (tuberculose, légionellose, grippe) ou inflammatoires (asthme allergique, alvéolite allergique). La littérature fait état des bioaérosols en référant à des particules micrométriques du fait que la plupart des méthodes utilisées dans ces études ne permettent pas la capture et l’analyse des aérosols nanométriques. Ces aérosols nanométriques contiennent probablement seulement des fragments bactériens ou fongiques pouvant conserver un potentiel immunogène ou toxique. Des données préliminaires nous montrent que les bioaérosols nanométriques peuvent contenir des particules virales ‘viables’ et parfois même plus d’une par particule d’aérosol. En raison des limitations méthodologiques et instrumentales, très peu de données concernant la présence de virus infectieux sur des bioaérosols nanométriques sont présentement disponibles. La quasi-totalité des études s’étant attardées aux particules nanométriques ont été effectuées dans une optique de pollution chimique et particulaire de l’air.Le programme de recherche proposé a pour objectifs principaux 1) de décrire la charge virale portée sur différentes tailles d’aérosols, 2) Évaluer les changements dynamiques des aérosols mono- et poly-dispersés causés par différents paramètres environnementaux en chambre environnementale et en soufflerie, 3) d’évaluer l’intégrité des particules virales sur les différentes tailles d’aérosols en fonction des paramètres environnementaux. De plus, 4) Étudier la métagénomique virale de l’air dans les usines d’épuration des eaux usées.Cette programmation mettra à profit différents outils (modèles de bactériophages, monoazide de propidium, tambour rotatif environnemental) récemment développés au sein de divers projets de recherche (CRSNG CHRP) ou acquis récemment (FCI, MDEIE) afin d’amasser des données sur un sujet pour lequel, il n’existe que très peu de littérature.A l’aide d’un échantillonneur Electrical Low Pression Impactor (FCI), nous avons développé une méthodologie permettant de quantifier la concentration et la taille des aérosols dans un intervalle de 6nm à 10µm, récupérer les différentes fractions et effectuer des analyses moléculaires pour y quantifier la charge virale. Un tambour rotatif environnementale permet l’aérosolisation et la maturation des aérosols afin d’étudier l’effet de différents paramètres environnementaux sur les bioaérosols en termes de changement dans la taille et la concentration des aérosols ainsi que la viabilité des agents infectieux. Des modèles de virus utilisant des bactériophages ont été développés (CRSNG/IRSC PRCS) permettant de modéliser les aérosols viraux infectieux sans contraintes de confinement. Nous utiliserons ces modèles afin de générer des aérosols mono- et poly-dispersés dans notre tambour rotatif. Les aérosols générés de même que les changements de taille et concentrations issus des différentes conditions seront observés à l’aide d’un Aerodynamic particule sizer et d’un Scanning mobility particle sizer et en tirant profit de la technologie de l’échantillonneur ELPI. Nous utiliserons une approche de coloration au monoazide de propidium (MAP) permettant d’évaluer la proportion de microoganismes ayant subi des dommages lors de l’aérosolisation par qPCR applicable tant au niveau des bactéries que des virus. La métagénomique virale sera étudiée pour la première fois dans un contexte d’exposition humaine.