Régulations et fonctions de l'endonucléase DFF chez les cellules saines et en apoptoses

L选择了最重要的发展和维护功能，使组织活了下来。L的终曲《L的凋零》，以及《L的ADN》的片断形成了《军团的细胞凋亡》。DNA片断因子是L的主要内切酶。45 kDa(DFF45)和40 kDa(DFF40)。在L的活动中，Caspase-3的存在并不存在。L对核安全的保护和保护是防止意外事故的发生。L的目标是让L和L的关系破裂，因此L对此表示赞同。法院的目标是：一)生产后的变化，三)生产后的变化，三)生产后的生理变化，三)生产后的生理变化。淋巴细胞性疾病和神经细胞易感疾病与L的抗核抗体有关。作为总理，L在生产后的重要变化中扮演着重要的角色--S和L之间的关系。S与L的关系密切相关。S和S的关系很密切，S和S的关系也很密切。L先生对后继改造的重要性，以及L对这项工作的重视。(Ii)L的生物嵌合体的激活和改变后的变化确定了L的活动是正确的。L不在的时候利润丰厚，自然也不会有任何变化，因此，我们必须分析比较这些变化的原因。这是一种新的分析方法，用于修饰和确定信号，以及L对核的缺乏。三)生理学函数定义人。理性地提出了决定L对DFF40细胞的重要性以及线粒体的重要性。在L的领导下，我们在一个非常重要的十字架上寻找核子和功能。

L'apoptose est nécessaire au développement et au maintien du bon fonctionnement de tout organisme vivant. Dans l'étape finale de l'apoptose, il y a fragmentation de l'ADN et formation de corps apoptotiques. Le DFF (DNA fragmentation factor) est la principale endonucléase impliquée dans l'apoptose. Le DFF réside dans le noyau ou le cytoplasme sous forme d'hétérodimère composé d'une chaperonne de 45 kDa (DFF45) à activité inhibitrice et d'une sous unité endonucléase latente de 40 kDa (DFF40). Nos travaux ont permis d'établir qu'il existe en aval de la caspase-3 un ou plusieurs mécanismes de régulation de l'activité du DFF40. Ce point de contrôle de l'apoptose nucléaire est peu étudié et représenterait un moyen de protection contre une activation accidentelle du DFF. L'objectif de ce programme de recherche est de caractériser comment est régulée l'endonucléase DFF impliquée dans la fragmentation de l'ADN lors de l'apoptose. Les objectifs à court terme sont : I) de caractériser les changements post-traductionnels que subissent les sous-unités du DFF chez les cellules en prolifération et en apoptose, II) de déterminer les enzymes et voies de signalisation impliquées dans les modifications post-traductionnelles, III) d'établir d'autres fonctions physiologiques du DFF. Des lignées de cellules lymphoïdes et neuronales susceptibles ou résistantes à la fragmentation de l'ADN seront utilisées. Dans un premier temps, l'importance des changements post-traductionnels des sous-unités du DFF dans la régulation des événements nucléaires impliqués dans l'apoptose sera déterminée. A partir de fractions cellulaires et nucléaires obtenues de cellule en prolifération ou en état d'apoptose, nous déterminerons la présence de résidus phosphorylés ou acétylés ou O-glycosylés sur le DFF45 et le DFF40. Selon les résultats obtenus, des expériences de mutagenèse dirigée seront utilisées afin de cibler l'importance de ces modifications post-traductionnelles sur l'activité de cette endonucléase. II) L'activation des voies biochimiques associées à des changements post-traductionnels de certaines protéines peut représenter un autre niveau de contrôle de l'activité du DFF. Tirant profit de l'absence d'apoptose nucléaire dans les révertants naturels dans nos deux modèles cellulaires, nous proposons une analyse comparative des voies de signalisation cellulaire. Ce dernier type d'analyse nous permettra d'associer les modifications de certaines voies signalétiques et l'absence d'apoptose nucléaire. III) Déterminer le rôle du  DFF dans d'autres fonctions physiologiques. Nous proposons de déterminer l'importance du DFF40 dans la différenciation cellulaire et de déterminer son importance au niveau mitochondrial. Ce projet de recherche a une importance cruciale afin de comprendre l'apoptose nucléaire et les fonctions de la protéine DFF.**