课题基金 / 基金详情

PglB介导的一步合成多糖-蛋白缀合物疫苗平台构建

批准号:
31070824
项目类别:
面上项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
陈敏
依托单位:
学科分类:
生殖免疫与移植免疫
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘现伟、李磊、邹洋、党利君、房俊强、杨公进

项目摘要

结项摘要

项目成果

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中文摘要
多糖-蛋白缀合疫苗占目前使用的多糖疫苗的绝大多数。目前多糖-蛋白缀合疫苗生产多采用化学缀合方法,需要多步发酵和纯化过程,得率低,均一性差,成本高。本项目拟对最近才发现的细菌蛋白糖基化系统的寡糖基转移酶(PglB)进行研究,并将此系统和细菌脂多糖合成途径相偶联,最终构建一种新型、高效的多糖-蛋白缀合疫苗生产平台。本项目将以大肠杆菌O157:H7为研究模型,首先通过体外系统研究PglB对载体蛋白CRM197的底物适应性,并通过序列改造实现PglB对CRM197的一价和多价修饰,同时在模式宿主菌中构建细菌蛋白糖基化系统,利用此系统共表达O157:H7的O抗原多糖和载体蛋白CRM197,使其在宿主菌内缀合,从而建立PglB介导的多糖-蛋白缀合疫苗生产平台,实现通过一次发酵和纯化即可得到多糖-蛋白缀合疫苗的目的。此平台还可以扩展应用于其他病原菌的多糖-蛋白缀合物疫苗的生产。
英文摘要
根据PglB 底物特异性,对2种载体蛋白CRM197和大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)进行糖基化位点改造并完成了周质空间的表达。同时对宿主菌进行基因改造操作,将大肠杆菌O157:H7的O抗原合成基因簇转入宿主菌,实现特异O多糖的合成。在此基础上完成了 PglB的多糖-蛋白缀合疫苗平台的构建,对获得的多糖-蛋白缀合物进行检测。结果显示,CRM197和MBP均被糖基化。免疫实验发现多糖蛋白缀合物疫苗能够激起小鼠产生较高的抗O157的IgG抗体。同时发现多糖蛋白缀合物疫苗可活化Th1细胞,抑制Th2细胞活性。.以上结果表明我们已经成功构建O157的疫苗生产平台,并且此平台可以扩展应用于其他病原菌疫苗的生产。目前在学术刊物已经发表论文11篇,其中SCI文章9篇。整理好待投文章2篇。 培养硕士研究生6名(毕业3名),博士研究生2名。在该课题资助下,参加国际学术会议3次, 发表学术会议论文3篇。在国际国内形成了一定的影响,推动了相关科学研究的发展。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
biosynthesis of necleotide sugars by promiscuous udp-sugar pyrophosophorylase from arobdopsis thalina (Atusp)
通过来自 aobdopsis thalina 的混杂 udp-糖焦磷酸化酶生物合成核苷酸糖
DOI: --
发表时间: 2013
期刊: Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters
影响因子: 2.7
作者: [Wenjun Wang, Jie Shen, Peng George Wang, Min Chen]
通讯作者: Min Chen
one pot synthesis of UDP-sugars and their derivertives
UDP-糖及其衍生物的一锅合成
DOI: --
发表时间: 2013
期刊: Glycoconjugate Journal
影响因子: 3
作者: [min chen]
通讯作者: min chen
DOI: --
发表时间: 2012
期刊: 中国生物工程杂志
影响因子: --
作者: [刘骏, 陈敏]
通讯作者: 陈敏
DOI: --
发表时间: 2011
期刊: 中国生物工程杂志
影响因子: --
作者: [杨公进, 马中瑞, 信国, 陈敏]
通讯作者: 陈敏
共 10 条
    基于模块化组装策略快速制备细菌糖蛋白缀合物疫苗
    • 批准号:
      32070921
    • 项目类别:
      面上项目
    • 资助金额:
      58.0万元
    • 批准年份:
      2020
    • 负责人:
      陈敏
    • 依托单位:
    NGT介导的非wzy依赖途径细菌多糖蛋白质缀合物疫苗生产
    • 批准号:
      31770997
    • 项目类别:
      面上项目
    • 资助金额:
      60.0万元
    • 批准年份:
      2017
    • 负责人:
      陈敏
    • 依托单位:
    O157多糖蛋白疫苗的糖链数目及长度最佳配比研究
    • 批准号:
      31270983
    • 项目类别:
      面上项目
    • 资助金额:
      80.0万元
    • 批准年份:
      2012
    • 负责人:
      陈敏
    • 依托单位:
    国内基金
    海外基金