Selection of Color-Changing and Intensity-Increasing Fluorogenic Probe as Protein-Specific Indicator Obtained via the 10BASE(d)-T.
Selection of Color-Changing and Intensity-Increasing Fluorogenic Probe as Protein-Specific Indicator Obtained via the 10BASE(d)-T.
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DOI：
10.1021/acs.analchem.5b04687
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发表时间：
2016-01-19
影响因子：
7.4
通讯作者：
Ito, Yuji
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Taki, Masumi;Inoue, Hiroaki;Mochizuki, Kazuto;Yang, Jay;Ito, Yuji
为了获得特异性蛋白质检测的分子探针，我们利用基于gp 10的硫醚化（10 BASED-T）技术，在T7噬菌体上合成了多样性丰富的荧光探针库。从文库中筛选出一个显色性和开启性较好的探针，并获得了其与靶点特异性结合的理化性质。结合分析的荧光发射滴定，等温滴定量热法（ITC），和定量饱和转移差（STD）NMR测量，然后在计算机对接模拟，合理化的配体-蛋白质相互作用的最合理的几何形状。
To obtain a molecular probe for specific protein detection, we have synthesized fluorogenic probe library of vast diversity on bacteriophage T7 via the gp10 based-thioetherificaion (10BASEd-T). A remarkable color-changing and turning-on probe was selected from the library, and its physicochemical properties upon target-specific binding were obtained. Combination analyses of fluorescence emission titration, isothermal titration calorimetry (ITC), and quantitative saturation-transfer difference (STD) NMR measurements, followed by in silico docking simulation, rationalized the most plausible geometry of the ligand–protein interaction.
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