Engineering a high-affinity methyl-CpG-binding protein.
Engineering a high-affinity methyl-CpG-binding protein.
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DOI：
10.1093/nar/gkl527
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发表时间：
2006-08-07
影响因子：
14.9
通讯作者：
Bird AP
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Jørgensen HF;Adie K;Chaubert P;Bird AP
MBD蛋白家族的核心成员（MeCP2、MBD1、MBD2和MBD4）共享一个甲基-CpG结合结构域，该结构域对双链DNA中甲基化的CpG位点具有特异性亲和力。通过聚合Mbd1的MDB结构域，我们设计了一种多聚MBD蛋白，该蛋白在体外显示甲基cpg特异性结合，其解离常数比单体MBD高50倍。Poly-MBD蛋白也定位于细胞中甲基化的病灶，并可以在体内向报告蛋白构建体传递一个功能域。我们提出poly-MBD蛋白是检测分离的天然DNA甲基化水平和染色体CpG甲基化的细胞学检测的敏感试剂。
Core members of the MBD protein family (MeCP2, MBD1, MBD2 and MBD4) share a methyl-CpG-binding domain that has a specific affinity for methylated CpG sites in double-stranded DNA. By multimerizing the MDB domain of Mbd1, we engineered a poly-MBD protein that displays methyl-CpG-specific binding in vitro with a dissociation constant that is >50-fold higher than that of a monomeric MBD. Poly-MBD proteins also localize to methylated foci in cells and can deliver a functional domain to reporter constructs in vivo. We propose that poly-MBD proteins are sensitive reagents for the detection of DNA methylation levels in isolated native DNA and for cytological detection of chromosomal CpG methylation.
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影响因子：
14.9
作者：
Jørgensen HF;Adie K;Chaubert P;Bird AP
通讯作者：
Bird AP
影响因子：
30.8
作者：
Cross, SH;Meehan, RR;Bird, A
通讯作者：
Bird, A
影响因子：
64.5
作者：
Strick, R;Laemmli, UK
通讯作者：
Laemmli, UK
DOI：
10.1006/bbrc.1993.1750
发表时间：
1993-06-30
影响因子：
3.1
作者：
BALAGHI, M;WAGNER, C
通讯作者：
WAGNER, C
影响因子：
64.8
作者：
Nan, XS;Ng, HH;Bird, A
通讯作者：
Bird, A