X-ray Free Electron Laser Determination of Crystal Structures of Dark and Light States of a Reversibly Photoswitching Fluorescent Protein at Room Temperature.
X-ray Free Electron Laser Determination of Crystal Structures of Dark and Light States of a Reversibly Photoswitching Fluorescent Protein at Room Temperature.
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DOI：
10.3390/ijms18091918
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发表时间：
2017-09-07
影响因子：
5.6
通讯作者：
van Thor JJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Hutchison CDM;Cordon-Preciado V;Morgan RML;Nakane T;Ferreira J;Dorlhiac G;Sanchez-Gonzalez A;Johnson AS;Fitzpatrick A;Fare C;Marangos JP;Yoon CH;Hunter MS;DePonte DP;Boutet S;Owada S;Tanaka R;Tono K;Iwata S;van Thor JJ
光致变色荧光蛋白 Skylan-NS（非线性结构照明变体 mEos3.1H62L）是一种可逆光可切换荧光蛋白，具有未照明/基态、阴离子和顺式发色团构象以及高荧光量子产率。 515 nm 照明下的光转换产生具有中性反式发色团结构的亚稳定中间体，其寿命为 4 小时。我们通过在 SPring-8 埃紧凑型自由电子激光器 (SACLA) 在 7.0 keV 和 10.5 keV 以及在直线加速器相干光源 (LCLS) 在 9.5 keV 下进行的系列飞秒晶体学实验，展示了分辨率为 1.9 埃的顺式（开）态和极限分辨率为 1.55 埃的反式（关闭）态的 X 射线晶体结构。我们对两种在通量、光束特性和探测器技术方面不同的设施的数据简化和结构确定统计数据进行了比较。此外，对按需液滴、润滑脂注射和气体动态虚拟喷嘴 (GDVN) 注射的比较表明，极限分辨率没有显着差异。开态到关态的光转换包括内部和表面暴露的蛋白质结构变化，发生在正交晶体形式中缺乏晶体接触的区域。
The photochromic fluorescent protein Skylan-NS (Nonlinear Structured illumination variant mEos3.1H62L) is a reversibly photoswitchable fluorescent protein which has an unilluminated/ground state with an anionic and cis chromophore conformation and high fluorescence quantum yield. Photo-conversion with illumination at 515 nm generates a meta-stable intermediate with neutral trans-chromophore structure that has a 4 h lifetime. We present X-ray crystal structures of the cis (on) state at 1.9 Angstrom resolution and the trans (off) state at a limiting resolution of 1.55 Angstrom from serial femtosecond crystallography experiments conducted at SPring-8 Angstrom Compact Free Electron Laser (SACLA) at 7.0 keV and 10.5 keV, and at Linac Coherent Light Source (LCLS) at 9.5 keV. We present a comparison of the data reduction and structure determination statistics for the two facilities which differ in flux, beam characteristics and detector technologies. Furthermore, a comparison of droplet on demand, grease injection and Gas Dynamic Virtual Nozzle (GDVN) injection shows no significant differences in limiting resolution. The photoconversion of the on- to the off-state includes both internal and surface exposed protein structural changes, occurring in regions that lack crystal contacts in the orthorhombic crystal form.
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DOI：
10.1107/s1399004715006902
发表时间：
2015-06
期刊：
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography
影响因子：
--
作者：
Ginn HM;Brewster AS;Hattne J;Evans G;Wagner A;Grimes JM;Sauter NK;Sutton G;Stuart DI
通讯作者：
Stuart DI
DOI：
10.1126/science.1217737
发表时间：
2012-07-20
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Boutet S;Lomb L;Williams GJ;Barends TR;Aquila A;Doak RB;Weierstall U;DePonte DP;Steinbrener J;Shoeman RL;Messerschmidt M;Barty A;White TA;Kassemeyer S;Kirian RA;Seibert MM;Montanez PA;Kenney C;Herbst R;Hart P;Pines J;Haller G;Gruner SM;Philipp HT;Tate MW;Hromalik M;Koerner LJ;van Bakel N;Morse J;Ghonsalves W;Arnlund D;Bogan MJ;Caleman C;Fromme R;Hampton CY;Hunter MS;Johansson LC;Katona G;Kupitz C;Liang M;Martin AV;Nass K;Redecke L;Stellato F;Timneanu N;Wang D;Zatsepin NA;Schafer D;Defever J;Neutze R;Fromme P;Spence JC;Chapman HN;Schlichting I
通讯作者：
Schlichting I
影响因子：
1.3
作者：
Koerner, L. J.;Philipp, H. T.;Gruner, S. M.
通讯作者：
Gruner, S. M.
一系列独特的可逆可切换荧光蛋白，具有适合各种应用的有益特性
DOI：
10.1073/pnas.1113770109
发表时间：
2012-03-20
影响因子：
11.1
作者：
Chang, Hao;Zhang, Mingshu;Xu, Tao
通讯作者：
Xu, Tao
DOI：
10.1107/s0365110x52001441
发表时间：
1952-01-01
期刊：
ACTA CRYSTALLOGRAPHICA
影响因子：
--
作者：
CRUICKSHANK, DWJ
通讯作者：
CRUICKSHANK, DWJ