Isolation and characterization of a cDNA encoding porcine gastric haptocorrin.
Isolation and characterization of a cDNA encoding porcine gastric haptocorrin.
复制标题
编码猪胃 haptocorrin 的 cDNA 的分离和表征。
DOI：
10.1111/j.1432-1033.1990.tb15468.x
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发表时间：
1990
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Alpers,DH
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Hewitt,JE;Seetharam,B;Leykam,J;Alpers,DH
用寡核苷酸探针从猪胃粘膜λ gt 11 cDNA文库中克隆了一个编码胃结合咕啉的cDNA。该cDNA全长1.4kb，包含一个1.25kb的开放阅读框架和178个核苷酸的3′端非编码区。引物延伸分析表明，该克隆的转录起始位点仅位于5′端上游100 bp处，不含起始位点甲硫氨酸。北方杂交分析表明，猪胃粘膜中存在一个1.6kb的mRNA。通过北方印迹分析，该cDNA与大鼠颌下腺中的结合咕啉mRNA或胃RNA之间没有交叉杂交。在Southern印迹中也观察到缺乏交叉反应性，其中牛、羊和狗的基因组DNA显示交叉杂交条带，但大鼠和小鼠的基因组DNA均未显示交叉杂交条带。该cDNA的推导氨基酸序列与先前报道的大鼠内因子的比较[Dieckgraefe，B. K.等人（1988）Proc. Natl Acad. Sci. USA 85，46-50]显示出相当大的相似性，表明这些钴胺素结合蛋白可能具有共同的进化起源。
A cDNA encoding the gastric haptocorrin was isolated from a porcine gastric mucosal λgt11 cDNA library using oligonucleotide probes. The 1.4‐kb cDNA contains a 1.25‐kb open reading frame and 178 nucleotides of 3′ noncoding region. Although no initiator methionine is present, primer extension analysis indicated that the transcription initiation site is only 100 bp upstream of the 5′ end of this clone. Northern blot analysis showed that a single mRNA species of 1.6 kb exists in hog gastric mucosa. There was no cross‐hybridization between this cDNA and the mRNA for haptocorrin in rat submaxillary gland or gastric RNA by Northern blot analysis. This lack of cross‐reactivity was also seen on Southern blots, where cow, sheep and dog but neither rat nor mouse genomic DNAs showed cross‐hybridizing bands. Comparison of the deduced amino acid sequence of this cDNA with that previously reported for rat intrinsic factor [Dieckgraefe, B. K. et al. (1988)Proc. Natl Acad. Sci. USA 85, 46–50] showed considerable similarity, suggesting that these cobalamin‐binding proteins may have a common evolutionary origin.
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