Isolation of carbohydrate-specific CD4(+) T cell clones from mice after stimulation by two model glycoconjugate vaccines.
Isolation of carbohydrate-specific CD4(+) T cell clones from mice after stimulation by two model glycoconjugate vaccines.
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DOI：
10.1038/nprot.2012.138
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发表时间：
2012-12
期刊：
影响因子：
14.8
通讯作者：
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
在这里，我们描述了如何在两种糖结合疫苗刺激后分离碳水化合物特异性T细胞克隆(我们建议将其命名为Tabs)。我们描述了如何制备、纯化和鉴定两种可用于产生结核分枝杆菌的模型糖结合疫苗。这些糖结合疫苗(GBSIII-OVA和GBSIII-TT)是由B型链球菌多糖(GBSIII)与卵蛋白(OVA)或破伤风类毒素(TT)偶联而成的。当用GBSIII-OVA免疫小鼠后，碳水化合物表位被呈递给CD4+T细胞并被识别。随后，通过用GBSIII-TT刺激脾中的CD4+T细胞，在体外扩增识别多糖的CD4+T细胞。顺序使用两种不同的糖结合疫苗，其中含有与异种载体蛋白结合的相同多糖，选择并扩大碳水化合物特异性T细胞。该方案可以很容易地用于研究替代糖结合疫苗对免疫系统的刺激。这项协议需要1-2年的时间才能完成。
Here we describe how to isolate carbohydrate-specific T cell clones (for which we propose the designation ‘Tcarbs’) after stimulation by two glycoconjugate vaccines. We describe how to prepare, purify and characterize two model glycoconjugate vaccines that can be used to generate Tcarbs. These glycoconjugate vaccines (GBSIII-OVA and GBSIII-TT) are synthesized by conjugation of type III group B streptococcal polysaccharide (GBSIII) to ovalbumin (OVA) or tetanus toxoid (TT). Upon immunization of mice with GBSIII-OVA, carbohydrate epitopes are presented to and recognized by CD4+ T cells. Subsequently, polysaccharide-recognizing CD4+ T cells are expanded in vitro by stimulating splenic CD4+ T cells with GBSIII-TT. The sequential use of two distinct glycoconjugate vaccines containing the same polysaccharide conjugated to heterologous carrier proteins selects for and expands carbohydrate-specific T cells. This protocol can readily be adapted to study the stimulation of the immune system by alternative glycoconjugate vaccines. This protocol takes 1–2 years to complete.
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DOI：
10.1038/newbio245012a0
发表时间：
1973-01-01
期刊：
NATURE-NEW BIOLOGY
影响因子：
--
作者：
COUTINHO, A;MOLLER, G
通讯作者：
MOLLER, G
DOI：
10.1084/jem.152.2.361
发表时间：
1980-08-01
期刊：
The Journal of experimental medicine
影响因子：
--
作者：
Schneerson R;Barrera O;Sutton A;Robbins JB
通讯作者：
Robbins JB
影响因子：
15.9
作者：
WESSELS, MR;PAOLETTI, LC;JENNINGS, HJ
通讯作者：
JENNINGS, HJ
影响因子：
4.4
作者：
Colino, Jesus;Chattopadhyay, Gouri;Snapper, Clifford M.
通讯作者：
Snapper, Clifford M.
影响因子：
82.9
作者：
Avci FY;Li X;Tsuji M;Kasper DL
通讯作者：
Kasper DL