Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
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DOI：
10.1038/nbt.2951
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发表时间：
2014-09
影响因子：
46.9
通讯作者：
Ebert, Benjamin L.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Heck, Dirk;Kowalczyk, Monika S.;Yudovich, David;Belizaire, Roger;Puram, Rishi V.;McConkey, Marie E.;Thielke, Anne;Aster, Jon C.;Regev, Aviv;Ebert, Benjamin L.
基因组测序研究表明，人类恶性肿瘤通常在四个或更多个驱动基因中发生突变，但很难在使用常规育种的小鼠模型中重现这种遗传复杂性。在这里，我们使用基因组编辑的CRISPR-Cas9系统来克服这一限制。通过用慢病毒载体递送小向导RNA（sgRNA）和Cas9的组合，我们在单个小鼠造血干细胞（HSC）中修饰了多达5个基因，导致克隆生长和骨髓恶性肿瘤。因此，我们产生了急性髓性白血病（AML）的模型，在编码表观遗传修饰因子，转录因子和细胞因子信号传导介质的基因中存在协同突变，重现了在人类疾病中观察到的突变组合。我们的研究结果表明，慢病毒递送的sgRNA：Cas9基因组编辑应该有助于设计一系列更好地反映人类疾病复杂性的体内癌症模型。
Genome sequencing studies have shown that human malignancies often bear mutations in four or more driver genes, but it is difficult to recapitulate this degree of genetic complexity in mouse models using conventional breeding. Here we use the CRISPR-Cas9 system of genome editing to overcome this limitation. By delivering combinations of small guide RNAs (sgRNAs) and Cas9 with a lentiviral vector, we modified up to five genes in a single mouse hematopoietic stem cell (HSC), leading to clonal outgrowth and myeloid malignancy. We thereby generated models of acute myeloid leukemia (AML) with cooperating mutations in genes encoding epigenetic modifiers, transcription factors, and mediators of cytokine signaling, recapitulating the combinations of mutations observed in the human disease. Our results suggest that lentivirus-delivered sgRNA:Cas9 genome editing should be useful to engineer a broad array of in vivo cancer models that better reflect the complexity of human disease.
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影响因子：
46.9
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
56.9
作者：
Jinek, Martin;Chylinski, Krzysztof;Charpentier, Emmanuelle
通讯作者：
Charpentier, Emmanuelle
影响因子：
46.9
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
50.3
作者：
Moran-Crusio K;Reavie L;Shih A;Abdel-Wahab O;Ndiaye-Lobry D;Lobry C;Figueroa ME;Vasanthakumar A;Patel J;Zhao X;Perna F;Pandey S;Madzo J;Song C;Dai Q;He C;Ibrahim S;Beran M;Zavadil J;Nimer SD;Melnick A;Godley LA;Aifantis I;Levine RL
通讯作者：
Levine RL
DOI：
10.1126/science.1232033
发表时间：
2013-02-15
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Mali P;Yang L;Esvelt KM;Aach J;Guell M;DiCarlo JE;Norville JE;Church GM
通讯作者：
Church GM