Visualization of the Nucleolus Using Ethynyl Uridine.
Visualization of the Nucleolus Using Ethynyl Uridine.
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DOI：
10.3389/fpls.2018.00177
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发表时间：
2018
影响因子：
5.6
通讯作者：
Fajkus J
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Dvořáčková M;Fajkus J
得益于最新的创新方法，复制或转录等关键细胞过程可以直接在完整组织中原位可视化。许多研究使用所谓的点击 iT 化学，其中新生 DNA 可以通过 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 (EdU) 追踪，新生 RNA 通过 5-乙炔基尿苷 (EU) 追踪。虽然 EdU 对复制 DNA 的标记已经很成熟，并在植物中得到进一步利用，但使用 EU 来揭示新生 RNA 的技术尚未发展到如此程度。在本文中，我们提出了使用 EU 标记核仁 RNA 转录本的方案，并表明 EU 有效地突出了核仁。该方法是有利的，因为可以避免当核仁必须可视化时需要制备表达荧光标记的核仁成分的转基因植物。
Thanks to recent innovative methodologies, key cellular processes such as replication or transcription can be visualized directly in situ in intact tissues. Many studies use so-called click iT chemistry where nascent DNA can be tracked by 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU), and nascent RNA by 5-ethynyl uridine (EU). While the labeling of replicating DNA by EdU has already been well established and further exploited in plants, the use of EU to reveal nascent RNA has not been developed to such an extent. In this article, we present a protocol for labeling of nucleolar RNA transcripts using EU and show that EU effectively highlights the nucleolus. The method is advantageous, because the need to prepare transgenic plants expressing fluorescently tagged nucleolar components when the nucleolus has to be visualized can be avoided.
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