DNA-mediated gene transfer without carrier DNA.

DNA-mediated gene transfer without carrier DNA.
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DNA 介导的基因转移,无需载体 DNA。

DOI:
10.1083/jcb.91.1.153
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发表时间:
1981
期刊:
The Journal of cell biology
影响因子:
--
通讯作者:
Ruddle,FH
Ruddle,FH
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Huttner,KM;Barbosa,JA;Scangos,GA;Pratcheva,DD;Ruddle,FH

文献摘要

参考文献

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DNA介导的基因转移是一种利用纯化的DNA将新的遗传元素引入培养细胞的过程。标准的DNA介导的基因转移程序包括使用全细胞DNA作为转移的载体DNA。我们修改了标准的DNA介导的基因转移程序,在缺乏全细胞载体DNA的情况下将单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因(TK)转移到TK-小鼠受体细胞中。大多数(8/10)无载体转化系稳定表达TK+表型,与我们用含载体dna介导的基因转移的结果形成鲜明对比。独立转化体的供体DNA含量差异较大。利用DNA限制性酶切和原位杂交对一个转化系的进一步分析提供了证据,证明在没有完整细胞载体DNA的情况下,多个供体DNA序列在单个染色体位点集成。
DNA-mediated gene transfer is a procedure which uses purified DNA to introduce new genetic elements into cells in culture. The standard DNA-mediated gene transfer procedure involves the use of whole cell DNA as carrier DNA for the transfer. We have modified the standard DNA-mediated gene transfer procedure to transfer the Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase gene (TK) into TK- murine recipient cells in the absence of whole cell carrier DNA. The majority (8/10) of carrier-free transformant lines expressed the TK+ phenotype stably, in sharp contrast to our results with carrier-containing DNA-mediated gene transfer. There was a wide range in donor DNA content among independent transformants. Further analysis on one transformant line using DNA restriction digests and in situ hybridization provided evidence that, in the absence of whole cell carrier DNA, multiple donor DNA sequences became integrated at a single chromosomal site.
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