Programmed DNA destruction by miniature CRISPR-Cas14 enzymes.
Programmed DNA destruction by miniature CRISPR-Cas14 enzymes.
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DOI：
10.1126/science.aav4294
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发表时间：
2018-11-16
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Doudna JA
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Harrington LB;Burstein D;Chen JS;Paez-Espino D;Ma E;Witte IP;Cofsky JC;Kyrpides NC;Banfield JF;Doudna JA
CRISPR-Cas系统为微生物提供了对感染性核酸的适应性免疫，并被广泛用作基因组编辑工具。这些工具利用RNA引导的Cas蛋白，其大尺寸（950-1400个氨基酸）被认为是其特异性DNA或RNA靶向活性所必需的。在这里，我们提出了一组来自未培养古细菌的CRISPR-Cas系统，其中包含Cas 14，这是一个非常紧凑的RNA引导核酸酶家族（400-700个氨基酸）。尽管它们的尺寸很小，但Cas 14蛋白能够靶向单链DNA（ssDNA）切割，而没有限制性序列要求。此外，Cas 14的靶标识别触发ssDNA分子的非特异性切割，这是一种能够实现高保真SNP基因分型（Cas 14-DETECTR）的活性。宏基因组数据显示，多个CRISPR-Cas 14系统独立进化，并表明基于单效应CRISPR的适应性免疫的潜在进化起源。
CRISPR-Cas systems provide microbes with adaptive immunity to infectious nucleic acids and are widely employed as genome editing tools. These tools utilize RNA-guided Cas proteins whose large size (950—1400 amino acids) has been considered essential to their specific DNA- or RNA-targeting activities. Here we present a set of CRISPR-Cas systems from uncultivated archaea that contain Cas14, a family of exceptionally compact RNA-guided nucleases (400—700 amino acids). Despite their small size, Cas14 proteins are capable of targeted single-stranded DNA (ssDNA) cleavage without restrictive sequence requirements. Moreover, target recognition by Cas14 triggers non-specific cutting of ssDNA molecules, an activity that enables high-fidelity SNP genotyping (Cas14-DETECTR). Metagenomic data show that multiple CRISPR-Cas14 systems evolved independently and suggest a potential evolutionary origin of single-effector CRISPR-based adaptive immunity.
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影响因子：
48
作者：
Langmead, Ben;Salzberg, Steven L.
通讯作者：
Salzberg, Steven L.
DOI：
10.1126/science.aaf5573
发表时间：
2016-08-05
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Abudayyeh OO;Gootenberg JS;Konermann S;Joung J;Slaymaker IM;Cox DB;Shmakov S;Makarova KS;Semenova E;Minakhin L;Severinov K;Regev A;Lander ES;Koonin EV;Zhang F
通讯作者：
Zhang F
CRISPR-C2C2的两种不同的RNase活性启用了指导RNA处理和RNA检测。
影响因子：
64.8
作者：
East-Seletsky A;O'Connell MR;Knight SC;Burstein D;Cate JH;Tjian R;Doudna JA
通讯作者：
Doudna JA
影响因子：
14.9
作者：
Grissa, Ibtissem;Vergnaud, Gilles;Pourcel, Christine
通讯作者：
Pourcel, Christine
影响因子：
16
作者：
Ma E;Harrington LB;O'Connell MR;Zhou K;Doudna JA
通讯作者：
Doudna JA