Modulation of Fluorescent Protein Chromophores To Detect Protein Aggregation with Turn-On Fluorescence.
Modulation of Fluorescent Protein Chromophores To Detect Protein Aggregation with Turn-On Fluorescence.
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DOI：
10.1021/jacs.8b02176
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发表时间：
2018-06-20
影响因子：
15
通讯作者：
Zhang X
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Liu Y;Wolstenholme CH;Carter GC;Liu H;Hu H;Grainger LS;Miao K;Fares M;Hoelzel CA;Yennawar HP;Ning G;Du M;Bai L;Li X;Zhang X
我们提出了一种利用结构调节的荧光蛋白发色团在活细胞中显示特定目的蛋白的错误折叠和聚集的荧光方法。结合光物理分析、X射线结晶学和理论计算，我们证明了在粘性溶剂或蛋白质聚集体的刚性微环境中，荧光是通过抑制这些荧光团的扭曲分子内电荷转移而触发的。荧光团与Halo-Tag融合目标蛋白的生物正交结合允许对活细胞中错误折叠和聚集的物种进行荧光检测。与其他方法不同，我们的方法能够检测以前看不见的错误折叠的可溶性蛋白质。这项工作首次应用荧光蛋白发色团来检测活细胞中的蛋白质构象崩溃。
We present a fluorogenic method to visualize misfolding and aggregation of a specific protein-of-interest in live cells using structurally modulated fluorescent protein chromophores. Combining photo-physical analysis, X-ray crystallography, and theoretical calculation, we show that fluorescence is triggered by inhibition of twisted-intramolecular charge transfer of these fluorophores in the rigid microenvironment of viscous solvent or protein aggregates. Bioorthogonal conjugation of the fluorophore to Halo-tag fused protein-of-interests allows for fluorogenic detection of both misfolded and aggregated species in live cells. Unlike other methods, our method is capable of detecting previously invisible misfolded soluble proteins. This work provides the first application of fluorescent protein chromophores to detect protein conformational collapse in live cells.
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DOI：
10.1126/science.1207339
发表时间：
2011-07-29
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Paige JS;Wu KY;Jaffrey SR
通讯作者：
Jaffrey SR
影响因子：
15
作者：
Baranov, Mikhail S.;Lukyanov, Konstantin A.;Solntsev, Kyril M.
通讯作者：
Solntsev, Kyril M.
影响因子：
62.1
作者：
Subach, Fedor V.;Verkhusha, Vladislav V.
通讯作者：
Verkhusha, Vladislav V.
影响因子：
3.2
作者：
Haidekker, Mark A.;Theodorakis, Emmanuel A.
通讯作者：
Theodorakis, Emmanuel A.
影响因子：
--
作者：
Qin, Luoheng;Vastl, Julian;Gao, Jianmin
通讯作者：
Gao, Jianmin