NMR structure of the enzyme GatB of the galactitol‐specific phosphoenolpyruvate‐dependent phosphotransferase system and its interaction with GatA
NMR structure of the enzyme GatB of the galactitol‐specific phosphoenolpyruvate‐dependent phosphotransferase system and its interaction with GatA
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半乳糖醇特异性磷酸烯醇丙酮酸依赖性磷酸转移酶系统的酶 GatB 的 NMR 结构及其与 GatA 的相互作用
作者：
L. Volpon;C. R. Young;A. Matte;K. Gehring
磷酸烯醇丙酮酸依赖性碳水化合物转运系统（PTS）在原核生物中将各种碳水化合物的摄取与磷酸化偶联。在这种多酶复合物中，酶II（EII）是一种碳水化合物特异性通透酶，由两个胞质结构域IIA和IIB以及一个跨膜通道IIC结构域组成。在大肠杆菌中鉴定的5个EIIs家族中，半乳糖醇特异性转运蛋白（IIgat）属于葡萄糖醇家族，在结构上表征最不充分。在这里，我们使用核磁共振（NMR）光谱来解决IIB亚基（GatB）的三维结构。GatB由一个中心的四股平行β折叠组成，两侧是α螺旋; GatB的活性位点半胱氨酸位于β1和α1之间的非结构化环的起始处，该环折叠成P环样结构。这种结构排列显示出与其他IIB亚基的相似性，但也与哺乳动物低分子量蛋白酪氨酸磷酸酶（LMW PTH 4）和砷酸还原酶（ArsC）。进行NMR滴定以鉴定加塔相互作用残基。
The phosphoenolpyruvate‐dependent carbohydrate transport system (PTS) couples uptake with phosphorylation of a variety of carbohydrates in prokaryotes. In this multienzyme complex, the enzyme II (EII), a carbohydrate‐specific permease, is constituted of two cytoplasmic domains, IIA and IIB, and a transmembrane channel IIC domain. Among the five families of EIIs identified in Escherichia coli, the galactitol‐specific transporter (IIgat) belongs to the glucitol family and is structurally the least well‐characterized. Here, we used nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy to solve the three‐dimensional structure of the IIB subunit (GatB). GatB consists of a central four‐stranded parallel β‐sheet flanked by α‐helices on both sides; the active site cysteine of GatB is located at the beginning of an unstructured loop between β1 and α1 that folds into a P‐loop‐like structure. This structural arrangement shows similarities with other IIB subunits but also with mammalian low molecular weight protein tyrosine phosphatases (LMW PTPase) and arsenate reductase (ArsC). An NMR titration was performed to identify the GatA‐interacting residues.
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J. Tchieu;Norris;J. Edwards;M. Saier
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J. Tchieu;Norris;J. Edwards;M. Saier
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DOI：
10.1126/science.1279804
发表时间：
1992
期刊：
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SaierJr,MH
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通讯作者：
J. Peng;G. Wagner
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