Autophagy: assays and artifacts.
Autophagy: assays and artifacts.
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DOI：
10.1002/path.2694
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发表时间：
2010-06
影响因子：
7.3
通讯作者：
Macleod, Kay F.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Barth, Sandra;Glick, Danielle;Macleod, Kay F.
自噬是一种基本的和系统发育保守的自我降解过程，其特征是在细胞内货物周围形成双层囊泡(自噬小体)，以运送到溶酶体和蛋白质降解。在高等真核生物中，自噬在发育和疾病中的重要性日益受到重视，这使得对监测活细胞和动物体内自噬的可靠、有意义和定量的分析方法的有效性变得更加重要。到目前为止，通过蛋白质印迹或荧光研究来检测加工过的LC3B-II，以及电子显微镜下自噬小体的形成，一直是自噬检测的主要手段。然而，在不同的细胞类型和对不同的压力反应中，LC3的表达水平可能会有显著的差异，而且也有人担心，为了便于成像和检测自噬而过度表达的LC3会干扰这一过程本身。此外，人们认识到，监测自噬的静态水平是不够的，但测量“自噬通量”是不够的，这推动了检测自噬的新方法或改进方法的发展。在这里，我们提出了一个关键的概述，目前的方法来衡量细胞和动物的自噬。
Autophagy is a fundamental and phylogenetically conserved self-degradation process that is characterized by the formation of double-layered vesicles (autophagosomes) around intracellular cargo for delivery to lysosomes and proteolytic degradation. The increasing significance attached to autophagy in development and disease in higher eukaryotes has placed greater importance on the validation of reliable, meaningful and quantitative assays to monitor autophagy in live cells and in vivo in the animal. To date, the detection of processed LC3B-II by western blot or fluorescence studies, together with electron microscopy for autophagosome formation, have been the mainstays for autophagy detection. However, LC3 expression levels can vary markedly between different cell types and in response to different stresses, and there is also concern that over-expression of tagged versions of LC3 to facilitate imaging and detection of autophagy interferes with the process itself. In addition, the realization that it is not sufficient to monitor static levels of autophagy but to measure ‘autophagic flux’ has driven the development of new or modified approaches to detecting autophagy. Here, we present a critical overview of current methodologies to measure autophagy in cells and in animals.
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影响因子：
7.8
作者：
ASHFORD, T P;PORTER, K R
通讯作者：
PORTER, K R
DOI：
10.1083/jcb.111.3.941
发表时间：
1990-09
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Kopitz J;Kisen GO;Gordon PB;Bohley P;Seglen PO
通讯作者：
Seglen PO
影响因子：
13.3
作者：
Ju JS;Miller SE;Jackson E;Cadwell K;Piwnica-Worms D;Weihl CC
通讯作者：
Weihl CC
影响因子：
64.8
作者：
Kuma, A;Hatano, M;Mizushima, N
通讯作者：
Mizushima, N
影响因子：
21.3
作者：
Hayashi-Nishino, Mitsuko;Fujita, Naonobu;Yamamoto, Akitsugu
通讯作者：
Yamamoto, Akitsugu