Engineering circular RNA for enhanced protein production.
Engineering circular RNA for enhanced protein production.
复制标题
DOI：
10.1038/s41587-022-01393-0
复制
发表时间：
2023-03
影响因子：
46.9
通讯作者：
Chang HY
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Chen R;Wang SK;Belk JA;Amaya L;Li Z;Cardenas A;Abe BT;Chen CK;Wender PA;Chang HY
环状 RNA (circRNA) 是真核细胞中稳定且普遍存在的 RNA，由反向剪接产生。合成的 circRNA 和一些内源性 circRNA 可以编码蛋白质，提高了 circRNA 作为基因表达平台的前景。在这项研究中，我们开发了一种系统方法，用于快速组装和测试影响合成 circRNA 蛋白质生产的特征。为了最大化circRNA翻译，我们优化了五个要素：载体拓扑、5'和3'非翻译区、内部核糖体进入位点和招募翻译起始机制的合成适体。总之，这些设计原则将 circRNA 蛋白产量提高了数百倍，在体外提供了比信使 RNA 更高的翻译，在体内提供了更持久的翻译，并且可推广到多个转基因。通过优化载体设计，环状 RNA 的蛋白质表达增强了数百倍。
Circular RNAs (circRNAs) are stable and prevalent RNAs in eukaryotic cells that arise from back-splicing. Synthetic circRNAs and some endogenous circRNAs can encode proteins, raising the promise of circRNA as a platform for gene expression. In this study, we developed a systematic approach for rapid assembly and testing of features that affect protein production from synthetic circRNAs. To maximize circRNA translation, we optimized five elements: vector topology, 5′ and 3′ untranslated regions, internal ribosome entry sites and synthetic aptamers recruiting translation initiation machinery. Together, these design principles improve circRNA protein yields by several hundred-fold, provide increased translation over messenger RNA in vitro, provide more durable translation in vivo and are generalizable across multiple transgenes. Protein expression from circular RNAs is enhanced several hundred-fold by optimizing vector design.
登录
查看更多内容
影响因子：
3.7
作者：
Engler, Carola;Kandzia, Romy;Marillonnet, Sylvestre
通讯作者：
Marillonnet, Sylvestre
影响因子：
16
作者：
Huston NC;Wan H;Strine MS;de Cesaris Araujo Tavares R;Wilen CB;Pyle AM
通讯作者：
Pyle AM
影响因子：
14.9
作者：
Enuka Y;Lauriola M;Feldman ME;Sas-Chen A;Ulitsky I;Yarden Y
通讯作者：
Yarden Y
影响因子：
48
作者：
Gibson, Daniel G.;Young, Lei;Smith, Hamilton O.
通讯作者：
Smith, Hamilton O.
DOI：
10.1056/nejmoa2035389
发表时间：
2021-02-04
期刊：
The New England journal of medicine
影响因子：
--
作者：
Baden LR;El Sahly HM;Essink B;Kotloff K;Frey S;Novak R;Diemert D;Spector SA;Rouphael N;Creech CB;McGettigan J;Khetan S;Segall N;Solis J;Brosz A;Fierro C;Schwartz H;Neuzil K;Corey L;Gilbert P;Janes H;Follmann D;Marovich M;Mascola J;Polakowski L;Ledgerwood J;Graham BS;Bennett H;Pajon R;Knightly C;Leav B;Deng W;Zhou H;Han S;Ivarsson M;Miller J;Zaks T;COVE Study Group
通讯作者：
COVE Study Group