Macromolecular Assemblies of the Mammalian Circadian Clock.
Macromolecular Assemblies of the Mammalian Circadian Clock.
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DOI：
10.1016/j.molcel.2017.07.017
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发表时间：
2017-09-07
期刊：
影响因子：
16
通讯作者：
Weitz CJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Aryal RP;Kwak PB;Tamayo AG;Gebert M;Chiu PL;Walz T;Weitz CJ
哺乳动物的生物钟建立在反馈环的基础上，其中 PER 和 CRY 蛋白抑制它们自身的转录。我们发现，在小鼠肝细胞核中，所有三种 PER、CRY 和酪蛋白激酶-1δ (CK1δ) 一起存在于 ~1.9-MDa 阻遏物组件中，该组件定量地整合了其 CLOCK-BMAL1 转录因子靶标。在掺入之前，CLOCK-BMAL1 存在于 750 kDa 的复合物中。单粒子电子显微镜 (EM) 显示从小鼠肝脏纯化的核 PER 复合物为准球形~40 nm 结构。在细胞质中，PER、CRY 和 CK1δ 分布成几个约 0.9-1.1 MDa 的复合物，这些复合物似乎构成了受 GAPVD1（一种细胞质运输因子）调节的组装途径。两种纯化的细胞质 PER 复合物的单粒子 EM 分别显示了约 20 nm 和约 25 nm 的结构，其特征是灵活束缚的球状结构域。我们的结果定义了构成昼夜节律反馈环的大分子组装体，并提供了内源性真核生物钟机制的初始结构视图。阿里亚尔等人。报道称，细胞核中的核心生物钟蛋白以约 1.9-MDa、准球形、40 nm 复合物的形式存在。在细胞质中，时钟蛋白被整合到几个约 0.9-1.1 MDa 的复合物中，代表了可能的组装途径。两种是柔性的多球状结构，分别为~20 和~25 nm。
The mammalian circadian clock is built on a feedback loop in which PER and CRY proteins repress their own transcription. We found that in mouse liver nuclei all three PERs, both CRYs, and Casein Kinase-1δ (CK1δ) are present together in a ~1.9-MDa repressor assembly that quantitatively incorporates its CLOCK-BMAL1 transcription factor target. Prior to incorporation, CLOCK-BMAL1 exists in a 750-kDa complex. Single-particle electron microscopy (EM) revealed nuclear PER complexes purified from mouse liver to be quasi-spherical ~40-nm structures. In the cytoplasm, PERs, CRYs, and CK1δ were distributed into several complexes of ~0.9–1.1 MDa that appear to constitute an assembly pathway regulated by GAPVD1, a cytoplasmic trafficking factor. Single-particle EM of two purified cytoplasmic PER complexes revealed ~20-nm and ~25-nm structures, respectively, characterized by flexibly-tethered globular domains. Our results define the macromolecular assemblies comprising the circadian feedback loop and provide an initial structural view of endogenous eukaryotic clock machinery. Aryal et al. report that core circadian clock proteins in the nucleus are present together in a ~1.9-MDa, quasi-spherical, 40-nm complex. In the cytoplasm, clock proteins are incorporated into several complexes of ~0.9–1.1 MDa, representing a likely assembly pathway. Two are flexible, multi-globular structures of ~20 and ~25 nm, respectively.
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影响因子：
16
作者：
Kim, Jin Young;Kwak, Pieter Bas;Weitz, Charles J.
通讯作者：
Weitz, Charles J.
DOI：
10.1073/pnas.1612917113
发表时间：
2016-10-11
影响因子：
11.1
作者：
Chiou, Yi-Ying;Yang, Yanyan;Sancar, Aziz
通讯作者：
Sancar, Aziz
影响因子：
3
作者：
Hohn, Michael;Tang, Grant;Ludtke, Steven J.
通讯作者：
Ludtke, Steven J.
影响因子：
64.5
作者：
Balsalobre, A;Damiola, F;Schibler, U
通讯作者：
Schibler, U
DOI：
10.1126/science.1222804
发表时间：
2012-07-13
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Huang N;Chelliah Y;Shan Y;Taylor CA;Yoo SH;Partch C;Green CB;Zhang H;Takahashi JS
通讯作者：
Takahashi JS