High-throughput capillary-electrophoresis analysis of the contents of a single mitochondria.
High-throughput capillary-electrophoresis analysis of the contents of a single mitochondria.
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DOI：
10.1021/ac900099y
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发表时间：
2009-05-15
影响因子：
7.4
通讯作者：
Chiu, Daniel T.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Allen, Peter B.;Doepker, Byron R.;Chiu, Daniel T.
我们提出了一种标记酸性细胞器内容物的技术，并利用激光诱导荧光快速释放、分离和检测它们的标记内容物。我们已经进行了溶液相分离的内容物的单个线粒体和单个100 nm的囊泡，这代表了一个演示的分析体积约1阿升。我们的策略，以标记的酸性内容的单光子依赖于使用的膜渗透性染料，俄勒冈州绿色二乙酸琥珀酰亚胺酯，和膜渗透性的基础，以提高线粒体内的pH值。为了测量的内容，我们利用玻璃微流控芯片和高电压梯度毫秒毛细管电泳分离后，单光子光解。我们观察到的异质性人口的线粒体相对于组成的化学成分。
We present a technique for labeling the contents of acidic organelles and rapidly releasing, separating, and detecting their labeled contents with laser-induced fluorescence. We have performed solution-phase separation of the contents of single mitochondria and single 100 nm vesicles, which represents a demonstration of an analyzed volume of ~1 attoliter. Our strategy to label the acidic contents of the mitochondrion relies on the use of the membrane-permeable dye, Oregon Green diacetate succinimidyl ester, and a membrane-permeable base to raise intra-mitochondrial pH. In order to measure the contents, we utilized a glass microfluidic chip and high voltage gradient for millisecond capillary-electrophoresis separation after single-mitochondrion photolysis. We observed heterogeneity among a population of mitochondria with respect to a constituent chemical component.
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影响因子：
7.4
作者：
Allen PB;Chiu DT
通讯作者：
Chiu DT
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Hu, S;Michels, DA;Dovichi, NJ
通讯作者：
Dovichi, NJ
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Chiu, Daniel T.