Massively parallel single-amino-acid mutagenesis.
Massively parallel single-amino-acid mutagenesis.
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DOI：
10.1038/nmeth.3223
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发表时间：
2015-03
期刊：
影响因子：
48
通讯作者：
Shendure, Jay
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Kitzman, Jacob O.;Starita, Lea M.;Lo, Russell S.;Fields, Stanley;Shendure, Jay
随机诱变方法仅部分覆盖突变空间，并且受到DNA合成长度限制的约束。在这里，我们展示了帕尔斯，一个单一的体积，定点诱变的方法，使用微阵列编程的寡核苷酸。我们创建了包含几乎所有错义突变作为酵母转录因子Gal4（99.9%覆盖率）和人肿瘤抑制因子p53（93.5%）的单例事件的文库。基于PAL的综合错义突变扫描可能有助于结构功能研究，蛋白质工程和临床测序鉴定的变体的解释。
Random mutagenesis methods only partially cover the mutational space, and are constrained by DNA synthesis length limitations. Here, we demonstrate PALS, a single-volume, site-directed mutagenesis approach using microarray-programmed oligonucleotides. We created libraries including nearly every missense mutation as singleton events for the yeast transcription factor Gal4 (99.9% coverage) and human tumor suppressor p53 (93.5%). PALS-based comprehensive missense mutational scans may aid structure-function studies, protein engineering, and the interpretation of variants identified by clinical sequencing.
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影响因子：
48
作者：
Fowler, Douglas M.;Fields, Stanley
通讯作者：
Fields, Stanley
影响因子：
48
作者：
Hiatt, Joseph B.;Patwardhan, Rupali P.;Turner, Emily H.;Lee, Choli;Shendure, Jay
通讯作者：
Shendure, Jay
影响因子：
46.9
作者：
通讯作者：
--
Pfunkel：高效，膨胀，用户定义的诱变。
影响因子：
3.7
作者：
Firnberg E;Ostermeier M
通讯作者：
Ostermeier M
DOI：
10.1261/rna.040709.113
发表时间：
2013-11
期刊：
RNA (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Melamed D;Young DL;Gamble CE;Miller CR;Fields S
通讯作者：
Fields S