Characterization of the mammalian RNA exonuclease 5/NEF-sp as a testis-specific nuclear 3' → 5' exoribonuclease.
Characterization of the mammalian RNA exonuclease 5/NEF-sp as a testis-specific nuclear 3' → 5' exoribonuclease.
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DOI：
10.1261/rna.060723.117
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发表时间：
2017-09
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Pillai RS
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Silva S;Homolka D;Pillai RS
核糖核酸酶催化功能性RNA的成熟或介导细胞转录物的降解，这些活性对于基因表达控制至关重要。在这里，我们确定了一个以前未知的哺乳动物核酸酶家族成员NEF-sp（RNA核酸外切酶5 [REXO 5]或LOC 81691）作为睾丸特异性因子。重组人NEF-sp具有二价金属离子依赖的3′ → 5′核糖核酸外切酶活性。这种活性对单链RNA底物具有特异性，并且与其长度无关。在RNA底物的3′端存在2′-O-甲基修饰是抑制性的。异位表达的NEF-sp定位于哺乳动物细胞培养物中的核仁/核区室，这依赖于氨基末端核定位信号。最后，缺乏NEF-sp的小鼠是可行的，并显示正常的生育能力，可能表明与其他核酸酶的重叠功能。总之，我们的研究提供了NEF-sp核糖核酸外切酶在哺乳动物基因组中的作用的第一个生物化学和遗传学探索。
Ribonucleases catalyze maturation of functional RNAs or mediate degradation of cellular transcripts, activities that are critical for gene expression control. Here we identify a previously uncharacterized mammalian nuclease family member NEF-sp (RNA exonuclease 5 [REXO5] or LOC81691) as a testis-specific factor. Recombinant human NEF-sp demonstrates a divalent metal ion-dependent 3′ → 5′ exoribonuclease activity. This activity is specific to single-stranded RNA substrates and is independent of their length. The presence of a 2′-O-methyl modification at the 3′ end of the RNA substrate is inhibitory. Ectopically expressed NEF-sp localizes to the nucleolar/nuclear compartment in mammalian cell cultures and this is dependent on an amino-terminal nuclear localization signal. Finally, mice lacking NEF-sp are viable and display normal fertility, likely indicating overlapping functions with other nucleases. Taken together, our study provides the first biochemical and genetic exploration of the role of the NEF-sp exoribonuclease in the mammalian genome.
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