Effect of ovarian steroids on gene expression related to synapse assembly in serotonin neurons of macaques.
Effect of ovarian steroids on gene expression related to synapse assembly in serotonin neurons of macaques.
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DOI：
10.1002/jnr.23004
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发表时间：
2012-07
影响因子：
4.2
通讯作者：
Reddy, Arubala P.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Bethea, Cynthia L.;Reddy, Arubala P.
关键词：
树突棘是神经可塑性的基本结构单位。在激素替代疗法 (HT) 模型中，我们研究了雌二醇 (E) 和黄体酮 (P) 对激光捕获的恒河猴血清素神经元富集制剂中突触组装相关基因表达的影响。进行了微阵列分析（n=2 只动物/处理），并通过 qRT-PCR 对额外的激光捕获材料（n=3 只动物/处理）确认了关键基因的结果。切除卵巢的恒河猴通过硅橡胶植入物接受安慰剂、E 或 E+P 治疗 1 个月。获得中脑，切片并进行色氨酸羟化酶（TPH）免疫染色。使用 Arcturus 激光解剖显微镜 (Pixel II) 激光捕获 TPH 阳性神经元。来自激光捕获的血清素神经元的 RNA 与恒河猴 Affymetrix 基因芯片杂交用于筛选目的。在 E 和 E+P 治疗的动物中，细胞粘附分子 (CAM) 类别中的 63 个探针组的表达发生了 2 倍或更大的变化，突触组装类别中的 31 个探针组的表达也发生了类似的改变。 qRT-PCR 检测显示，E 治疗可显着增加肝配蛋白受体 A4 (EPHA4) 和整合素 A8 (ITGA8) 的表达，但不会显着增加肝配蛋白受体 B4 (EPHB4) 或整合素 B8 (ITGB8) 的表达。与安慰剂相比，E 还增加了钙粘蛋白 11 (CDH11)、neuroligin 3 (NLGN3)、neurexin 3 (NRXN3)、syndecan 2 (SCD2) 和神经细胞粘附分子 (NCAM) 的表达。补充磷处理抑制了磷诱导的基因表达。总之，卵巢类固醇靶向血清素神经元中粘附分子的基因表达，这对突触组装很重要。
Dendritic spines are the elementary structural units of neural plasticity. In a model of hormone replacement therapy (HT), we sought the effect of estradiol (E) and progesterone (P) on gene expression related to synapse assembly in a laser captured preparation enriched for serotonin neurons from rhesus macaques. Microarray analysis was conducted (n=2 animals/treatment) and the results confirmed for pivotal genes with qRT-PCR on additional laser captured material (n=3 animals/treatment). Ovariectomized rhesus macaques were treated with either placebo, E or E+P via Silastic implants for 1 month. The midbrain was obtained, sectioned and immunostained for tryptophan hydroxylase (TPH). TPH-positive neurons were laser captured using an Arcturus Laser Dissection Microscope (Pixel II). RNA from laser captured serotonin neurons was hybridized to Rhesus Affymetrix GeneChips for screening purposes. There was a 2-fold or greater change in the expression of 63 probe sets in the Cell Adhesion Molecule (CAM) category, and 31 probe sets in the Synapse Assembly category were similarly altered in E and E+P treated animals. qRT-PCR assays showed that E-treatment induced a significant increase in Ephrin receptor A4 (EPHA4) and in Integrin A8 (ITGA8), but not Ephrin receptor B4 (EPHB4) or Integrin B8 (ITGB8) expression. E also increased expression of cadherin 11 (CDH11), neuroligin 3 (NLGN3), neurexin 3 (NRXN3), syndecan 2 (SCD2) and neural cell adhesion molecule (NCAM) compared to placebo. Supplemental P treatment suppressed E-induced gene expression. In summary, ovarian steroids target gene expression of adhesion molecules in serotonin neurons that are important for synapse assembly.
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