Studying protein-reconstituted proteoliposome fusion with content indicators in vitro.
Studying protein-reconstituted proteoliposome fusion with content indicators in vitro.
复制标题
DOI：
10.1002/bies.201300010
复制
发表时间：
2013-07
期刊：
影响因子：
4
通讯作者：
Brunger, Axel T.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Diao, Jiajie;Zhao, Minglei;Zhang, Yunxiang;Kyoung, Minjoung;Brunger, Axel T.
体外重构法是研究生物膜融合的常用方法。然而，迄今为止，大多数涉及SNARE蛋白的集合和单囊泡实验仅使用脂质混合而不是含量混合指标进行。通过同时检测脂质和小含量混合指标，我们发现在50秒的观察期内，对于Ca2+触发的与SNAREs、全长synaptotagmin-1和complexin的融合，脂质混合通常发生在含量混合前几秒，或者根本没有任何含量混合。我们的结果说明了通常使用的散装脂质混合聚变实验的注意事项。我们建议在蛋白脂质体融合实验中，除了脂质混合指标外，应始终使用含量混合指标或代替含量混合指标。
In vitro reconstitution assays are commonly used to study biological membrane fusion. However, to date, most ensemble and single-vesicle experiments involving SNARE proteins have been performed only with lipid-mixing, but not content-mixing indicators. Through simultaneous detection of lipid and small content-mixing indicators, we found that lipid mixing often occurs seconds prior to content mixing, or without any content mixing at all, during a 50-sec observation period, for Ca2+-triggered fusion with SNAREs, full-length synaptotagmin-1, and complexin. Our results illustrate the caveats of commonly used bulk lipid-mixing fusion experiments. We recommend that proteoliposome fusion experiments should always employ content-mixing indicators in addition to, or in place of, lipid-mixing indicators.
登录
查看更多内容
影响因子：
14.8
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
14.8
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
16.8
作者：
Araç, D;Chen, XC;Rizo, J
通讯作者：
Rizo, J
影响因子：
3
作者：
Hsieh, CE;Leith, A;Marko, M
通讯作者：
Marko, M
影响因子：
16.8
作者：
通讯作者：
--