Resolution doubling in light-sheet microscopy via oblique plane structured illumination.
Resolution doubling in light-sheet microscopy via oblique plane structured illumination.
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DOI：
10.1038/s41592-022-01635-8
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发表时间：
2022-11
期刊：
影响因子：
48
通讯作者：
Fiolka, Reto P.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Chen, Bingying;Chang, Bo-Jui;Roudot, Philippe;Zhou, Felix;Sapoznik, Etai;Marlar-Pavey, Madeleine;Hayes, James B.;Brown, Peter T.;Zeng, Chih-Wei;Lambert, Talley;Friedman, Jonathan R.;Zhang, Chun-Li;Burnette, Dylan T.;Shepherd, Douglas P.;Dean, Kevin M.;Fiolka, Reto P.
结构照明显微镜（SIM）使荧光显微镜的空间分辨率加倍，而不需要高激光功率或专门的荧光团。然而，离焦荧光的激发可加速光漂白和光毒性。相比之下，光片荧光显微镜（LSFM）在很大程度上避免了激发离焦荧光，从而实现低光漂白和内在光学切片的体积成像。将SIM与LSFM相结合将使3D成像的分辨率提高一倍。然而，SIM中各向同性分辨率加倍所需的照明图案的多个取向对于以光片格式实现是具有挑战性的。在这里，我们表明，多方向结构照明可以实现在斜平面显微镜，一个LSFM技术，使用一个单一的目标，激发和检测，在一个简单的方式。我们展示了低于150 nm的各向同性横向分辨率，与传统SIM系统相比具有较低的光毒性，体积采集速度超过1 Hz。
Structured illumination microscopy (SIM) doubles the spatial resolution of a fluorescence microscope without requiring high laser powers or specialized fluorophores. However, the excitation of out-of-focus fluorescence can accelerate photobleaching and phototoxicity. In contrast, light-sheet fluorescence microscopy (LSFM) largely avoids exciting out-of-focus fluorescence, thereby enabling volumetric imaging with low photo-bleaching and intrinsic optical sectioning. Combining SIM with LSFM would enable gentle 3D imaging at doubled resolution. However, multiple orientations of the illumination pattern, which are needed for isotropic resolution doubling in SIM, are challenging to implement in a light-sheet format. Here we show that multidirectional structured illumination can be implemented in oblique plane microscopy, a LSFM technique that uses a single objective for excitation and detection, in a straightforward manner. We demonstrate isotropic lateral resolution below 150nm, combined with lower photo-toxicity compared to traditional SIM systems and volumetric acquisition speed exceeding 1Hz.
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影响因子：
3.4
作者：
Dean, Kevin M.;Roudot, Philippe;Welf, Erik S.;Danuser, Gaudenz;Fiolka, Reto
通讯作者：
Fiolka, Reto
影响因子：
16.6
作者：
Jin, Luhong;Liu, Bei;Hahn, Klaus M.
通讯作者：
Hahn, Klaus M.
DOI：
10.1073/pnas.1609278114
发表时间：
2017-05-09
影响因子：
11.1
作者：
Chang, Bo-Jui;Meza, Victor Didier Perez;Stelzer, Ernst H. K.
通讯作者：
Stelzer, Ernst H. K.
影响因子：
3.8
作者：
Lai-Tim, Yann;Mugnier, Laurent M.;Meimon, Serge
通讯作者：
Meimon, Serge
影响因子：
2.4
作者：
Bodbin SE;Denning C;Mosqueira D
通讯作者：
Mosqueira D