Generation and characterization of monospecific and bispecific hexavalent trimerbodies.
Generation and characterization of monospecific and bispecific hexavalent trimerbodies.
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DOI：
10.4161/mabs.22698
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发表时间：
2013-01
期刊：
影响因子：
5.3
通讯作者：
Álvarez-Vallina L
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Blanco-Toribio A;Sainz-Pastor N;Álvarez-Cienfuegos A;Merino N;Cuesta ÁM;Sánchez-Martín D;Bonet J;Santos-Valle P;Sanz L;Oliva B;Blanco FJ;Álvarez-Vallina L
在这里，我们描述了一类新的用于治疗的多价多特异性抗体试剂。这些分子被称为“三聚体”，使用人胶原XVIII非胶原1结构域N-末端三聚区域的修饰版本，两侧有两个柔性连接物作为三聚支架。通过融合对三聚化支架结构域N-端和C-端具有相同或不同特异性的单链可变区(ScFv)，我们产生了单特异性或双特异性六价分子，这些分子可在转基因哺乳动物细胞中以可溶性蛋白的形式高效分泌。双特异性抗层粘连蛋白x-抗CD3N-/C-三聚体在溶液中是三聚体，对表达在T细胞表面的纯化的塑料固定化层粘连蛋白和CD3非常有效地识别，并且在人血清中非常稳定。在T细胞活化研究中进一步证实了这种双特异性。在富层粘连蛋白底物存在的情况下，双功能抗层粘连蛋白x抗CD3N-/C-三聚体刺激高比例的人T细胞表达表面激活标志。这些结果表明，三聚体平台为下一代治疗性抗体的开发提供了有希望的机会，即多价和双特异性分子，其形式优化了所需的药代动力学并适应了病理背景。
Here, we describe a new class of multivalent and multispecific antibody-based reagents for therapy. The molecules, termed “trimerbodies,” use a modified version of the N-terminal trimerization region of human collagen XVIII noncollagenous 1 domain flanked by two flexible linkers as trimerizing scaffold. By fusing single-chain variable fragments (scFv) with the same or different specificity to both N- and C-terminus of the trimerizing scaffold domain, we produced monospecific or bispecific hexavalent molecules that were efficiently secreted as soluble proteins by transfected mammalian cells. A bispecific anti-laminin x anti-CD3 N-/C-trimerbody was found to be trimeric in solution, very efficient at recognizing purified plastic-immobilized laminin and CD3 expressed at the surface of T cells, and remarkably stable in human serum. The bispecificity was further demonstrated in T cell activation studies. In the presence of laminin-rich substrate, the bispecific anti-laminin x anti-CD3 N-/C-trimerbody stimulated a high percentage of human T cells to express surface activation markers. These results suggest that the trimerbody platform offers promising opportunities for the development of the next-generation therapeutic antibodies, i.e., multivalent and bispecific molecules with a format optimized for the desired pharmacokinetics and adapted to the pathological context.
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影响因子：
3.7
作者：
Alonso-Camino, Vanesa;Sanchez-Martin, David;Alvarez-Vallina, Luis
通讯作者：
Alvarez-Vallina, Luis
影响因子：
5.3
作者：
Cuesta, Angel M.;Sanchez-Martin, David;Alvarez-Vallina, Luis
通讯作者：
Alvarez-Vallina, Luis
影响因子：
5.6
作者：
Boudko SP;Sasaki T;Engel J;Lerch TF;Nix J;Chapman MS;Bächinger HP
通讯作者：
Bächinger HP
DOI：
10.1074/jbc.m603275200
发表时间：
2006-11-10
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Hwang WC;Lin Y;Santelli E;Sui J;Jaroszewski L;Stec B;Farzan M;Marasco WA;Liddington RC
通讯作者：
Liddington RC
影响因子：
56.9
作者：
KUNG, PC;GOLDSTEIN, G;SCHLOSSMAN, SF
通讯作者：
SCHLOSSMAN, SF