Controlled translocation of individual DNA molecules through protein nanopores with engineered molecular brakes.
Controlled translocation of individual DNA molecules through protein nanopores with engineered molecular brakes.
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DOI：
10.1021/nl1038874
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发表时间：
2011-02-09
期刊：
影响因子：
10.8
通讯作者：
Maglia G
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Rincon-Restrepo M;Mikhailova E;Bayley H;Maglia G
蛋白质纳米孔可能提供一种廉价而快速的技术来对单个DNA分子进行测序。然而，ssDNA分子通过蛋白质纳米孔的电泳易位速度太快，无法进行碱基鉴定。在这里，我们展示了DNA分子通过α-溶血素蛋白纳米孔的易位可以通过位点定向诱变将正电荷引入孔腔来控制地减缓。虽然DNA易位过程中的剩余离子电流不足以直接进行碱基识别，但我们提出，工程孔可能用于减缓杂交系统中的DNA，例如与固态纳米孔结合。
Protein nanopores may provide a cheap and fast technology to sequence individual DNA molecules. However, the electrophoretic translocation of ssDNA molecules through protein nanopores has been too rapid for base identification. Here, we show that the translocation of DNA molecules through the α-hemolysin protein nanopore can be slowed controllably by introducing positive charges into the lumen of the pore by site directed mutagenesis. Although the residual ionic current during DNA translocation is insufficient for direct base identification, we propose that the engineered pores might be used to slow down DNA in hybrid systems, e.g. in combination with solid-state nanopores.
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