A dialysis cell for nuclear magnetic resonance spectroscopic measurement of protein-small molecule binding.

A dialysis cell for nuclear magnetic resonance spectroscopic measurement of protein-small molecule binding.
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用于核磁共振波谱测量蛋白质-小分子结合的透析池。

DOI:
10.1016/0003-2697(90)90235-2
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发表时间:
1990
影响因子:
2.9
通讯作者:
Schwab,CM
Schwab,CM
中科院分区:
生物学4区
文献类型:
--
作者:
Labotka,RJ;Schwab,CM

文献摘要

参考文献

被引文献

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描述了一种用于NMR光谱仪的透析池,以进行蛋白质-小分子结合的光谱测定。蛋白质溶液包含在圆柱形透析管中,圆柱形透析管同心地悬浮在含有无蛋白质透析缓冲液的NMR管中。同时测定的平衡跨膜分布的小分子和在两个隔室的化学位移光谱,提供估计的解离常数和化学位移的结合物种。在pH 6.9和21°C条件下,该池用于31 P NMR光谱测量2,3-二磷酸甘油酸与2.8 mm碳氧血红蛋白溶液中血红蛋白的结合程度。Kdis为2.4 × 10− 3 m。
A dialysis cell is described for use in an NMR spectrometer, to make spectroscopic determinations of protein-small molecule binding. The protein solution is contained within a cylindrical dialysis tube which is concentrically suspended in an NMR tube containing a protein-free dialysis buffer. Simultaneous determinations of the equilibrium transmembrane distribution of the small molecule and the chemical shifts in both compartments are made spectroscopically, providing estimates of the dissociation constant and the chemical shift of the bound species. The cell is used for31P NMR spectroscopic measurement of the degree of binding of 2,3-diphosphoglycerate to hemoglobin in a 2.8 mm carboxyhemoglobin solution at pH 6.9 and 21°C. The Kdis found to be 2.4 × 10−3m.
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