Identification of S-nitrosylated targets of thioredoxin using a quantitative proteomic approach.
Identification of S-nitrosylated targets of thioredoxin using a quantitative proteomic approach.
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DOI：
10.1021/bi100619k
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发表时间：
2010-08-17
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Stamler, Jonathan S.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Benhar, Moran;Thompson, J. Will;Moseley, M. Arthur;Stamler, Jonathan S.
可逆的蛋白质半胱氨酸亚硝基化（S-亚硝基化）是信号转导和其他不同细胞过程中的常见机制。蛋白质脱亚硝基化主要由半胱氨酸脱亚硝基酶介导，但这些酶的功能范围和意义并不完全确定，部分原因是其同源底物的信息有限。在这里，使用Jurkat细胞，我们采用稳定同位素标记的氨基酸在细胞培养（SILAC），再加上生物素开关技术和质谱，以确定46个新的底物的一个脱硝酶，硫氧还蛋白1。这些底物参与广泛的细胞功能，包括细胞骨架组织、细胞代谢、信号转导和氧化还原稳态。我们还确定了多种S-亚硝基化的蛋白质，不是硫氧还蛋白1的底物。在第二种细胞类型（RAW 264.7细胞）中验证了我们的主要发现。我们的研究结果指出，硫氧还蛋白1作为一个主要的蛋白质脱硝酶在哺乳动物细胞和展示的实用程序的定量蛋白质组学的大规模识别脱硝酶底物。
Reversible protein cysteine nitrosylation (S-nitrosylation) is a common mechanism utilized in signal transduction and other diverse cellular processes. Protein denitrosylation is largely mediated by cysteine denitrosylases, but the functional scope and significance of these enzymes are incompletely defined, in part due to limited information on their cognate substrates. Here, using Jurkat cells, we employed stable isotope labeling by amino acids in cell culture (SILAC), coupled to the biotin switch technique and mass spectrometry, to identify 46 new substrates of one denitrosylase, thioredoxin 1. These substrates are involved in a wide range of cellular functions including, cytoskeletal organization, cellular metabolism, signal transduction and redox homeostasis. We also identified multiple S-nitrosylated proteins that are not substrates of thioredoxin 1. A verification of our principal findings was made in a second cell type (RAW264.7 cells). Our results point to thioredoxin 1 as a major protein denitrosylase in mammalian cells and demonstrate the utility of quantitative proteomics for large-scale identification of denitrosylase substrates.
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DOI：
10.1006/bbrc.1998.9688
发表时间：
1998-11-27
影响因子：
3.1
作者：
Fang, KZ;Ragsdale, NV;Gaston, B
通讯作者：
Gaston, B
影响因子：
4.8
作者：
Gromer, S;Arscott, LD;Becker, K
通讯作者：
Becker, K
影响因子：
3.7
作者：
Lam YW;Yuan Y;Isaac J;Babu CV;Meller J;Ho SM
通讯作者：
Ho SM
影响因子：
13.6
作者：
Foster MW;Hess DT;Stamler JS
通讯作者：
Stamler JS
影响因子：
4.4
作者：
Haegglund, Per;Bunkenborg, Jakob;Svensson, Birte
通讯作者：
Svensson, Birte