Purification and Characterization of β-Actin-Rich Tumor Cell Pseudopodia: Role of Glycolysis
Purification and Characterization of β-Actin-Rich Tumor Cell Pseudopodia: Role of Glycolysis
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富含 β-肌动蛋白的肿瘤细胞伪足的纯化和表征：糖酵解的作用
DOI：
10.1006/excr.2000.4929
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发表时间：
2000
影响因子：
3.7
通讯作者：
Ivan R. Nabi
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Trung N. Nguyen;Hui;S. Zalzal;Antonio Nanci;Ivan R. Nabi
莫洛尼肉瘤病毒（Moloney sarcoma virus，mos）转化的MDCK细胞的侵袭性变异株MSV-MDCK-INV表达多个富含β-肌动蛋白的伪足（P. U. Le等人，Cancer Res.58，1631-1635，1998）。我们在这里表明，这些积极突出的细胞结构域的尖端是形态上不同的，呈现出许多水泡，并选择性地通过1 μ m孔过滤器。从过滤器的下侧纯化伪足，并鉴定主要蛋白质组分为糖酵解酶，甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）。通过共聚焦显微镜，GAPDH与肌动蛋白共定位在MSV-MDCK-INV伪足中，将该糖酵解酶定位于活性肌动蛋白聚合的该位点。用2-脱氧葡萄糖或草氨酸盐抑制糖酵解可诱导富含β-肌动蛋白的伪足迅速转化为延长的板状伪足，并阻止细胞运动。因此，局部糖酵解提供的能量调节富含β-肌动蛋白的伪足突起的形成，从而调节侵袭性肿瘤细胞的运动。
Abstract The MSV-MDCK-INV invasive variant of Moloney sarcoma virus ( mos ) transformed MDCK cells express multiple β-actin-rich pseudopodia (P. U. Le et al., Cancer Res. 58, 1631–1635, 1998). We show here that the tips of these actively protruding cellular domains are morphologically distinct presenting numerous blebs and selectively pass through 1-μm-pore filters. The pseudopodia were purified from the underside of the filters and a major protein component was identified as the glycolytic enzyme, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH). By confocal microscopy, GAPDH colocalized with actin in MSV-MDCK-INV pseudopodia localizing this glycolytic enzyme to this site of active actin polymerization. Inhibition of glycolysis with 2-deoxyglucose or oxamate induced a rapid transformation of β-actin-rich pseudopodia into extended lamellipodia and prevented cell motility. A localized glycolytic supply of energy therefore regulates the formation of β-actin-rich pseudopodial protrusions and thereby the motility of invasive tumor cells.
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