3D single-molecule super-resolution microscopy with a tilted light sheet.
3D single-molecule super-resolution microscopy with a tilted light sheet.
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DOI：
10.1038/s41467-017-02563-4
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发表时间：
2018-01-09
影响因子：
16.6
通讯作者：
Moerner WE
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Gustavsson AK;Petrov PN;Lee MY;Shechtman Y;Moerner WE
具有3D点扩散函数的倾斜光片显微术（TILT3D）将一种新颖的倾斜光片照明策略与长轴向范围点扩散函数（PSF）相结合，用于低背景、单分子的3D超定位以及厚细胞中的3D超分辨率成像。因为单个发射器的轴向位置被编码在每个单分子图像的形状中，而不是在光片的位置或厚度中，所以光片不需要非常薄。TILT3D是建立在一个标准的倒置显微镜，并有最少的自定义部件。结果是简单灵活的3D超分辨率成像，在整个厚哺乳动物细胞中具有数十nm的定位精度。我们通过使用双螺旋PSF进行单分子检测和最近开发的四足动物PSF进行基准珠跟踪和实时轴向漂移校正，对线粒体和全核层进行成像，验证了TILT3D在哺乳动物细胞中的3D超分辨率成像。光片单分子3D超分辨率显微镜不能靠近盖玻片成像，或者可能需要复杂的设备。在这里，作者克服了这样的限制，使用倾斜的光片战略与长轴向范围点扩散功能的标准倒置显微镜。
Tilted light sheet microscopy with 3D point spread functions (TILT3D) combines a novel, tilted light sheet illumination strategy with long axial range point spread functions (PSFs) for low-background, 3D super-localization of single molecules as well as 3D super-resolution imaging in thick cells. Because the axial positions of the single emitters are encoded in the shape of each single-molecule image rather than in the position or thickness of the light sheet, the light sheet need not be extremely thin. TILT3D is built upon a standard inverted microscope and has minimal custom parts. The result is simple and flexible 3D super-resolution imaging with tens of nm localization precision throughout thick mammalian cells. We validate TILT3D for 3D super-resolution imaging in mammalian cells by imaging mitochondria and the full nuclear lamina using the double-helix PSF for single-molecule detection and the recently developed tetrapod PSFs for fiducial bead tracking and live axial drift correction. Light-sheet single-molecule 3D super-resolution microscopes can’t image close to a coverslip or may require complex apparatus. Here the authors overcome such limitations using a tilted light sheet strategy with long axial range point spread functions on a standard inverted microscope.
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影响因子：
48
作者：
Abrahamsson, Sara;Chen, Jiji;Hajj, Bassam;Stallinga, Sjoerd;Katsov, Alexander Y.;Wisniewski, Jan;Mizuguchi, Gaku;Soule, Pierre;Mueller, Florian;Darzacq, Claire Dugast;Darzacq, Xavier;Wu, Carl;Bargmann, Cornelia I.;Agard, David A.;Dahan, Maxime;Gustafsson, Mats G. L.
通讯作者：
Gustafsson, Mats G. L.
影响因子：
--
作者：
Halpern, Aaron R;Howard, Marco D;Vaughan, Joshua C
通讯作者：
Vaughan, Joshua C
DOI：
10.1073/pnas.1114444108
发表时间：
2011-11-15
影响因子：
11.1
作者：
Lew, Matthew D.;Lee, Steven F.;Moerner, W. E.
通讯作者：
Moerner, W. E.
影响因子：
3.6
作者：
Lew MD;Lee SF;Badieirostami M;Moerner WE
通讯作者：
Moerner WE
DOI：
10.1073/pnas.0900245106
发表时间：
2009-03-03
影响因子：
11.1
作者：
Pavani, Sri Rama Prasanna;Thompson, Michael A.;Moerner, W. E.
通讯作者：
Moerner, W. E.