Pluripotency retention and exogenous mRNA introduction in planarian stem cells in culture.
Pluripotency retention and exogenous mRNA introduction in planarian stem cells in culture.
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DOI：
10.1016/j.isci.2023.106001
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发表时间：
2023-02-17
期刊：
影响因子：
5.8
通讯作者：
Alvarado, Alejandro Sanchez
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Lei, Kai;Zhang, Wenya;Chen, Jiajia;McKinney, Sean A.;Ross, Eric J.;Lee, Heng-Chi;Alvarado, Alejandro Sanchez
浮游生物拥有自然产生的多能成体干细胞(新生成体细胞)，这是动态平衡和全身再生所必需的。然而，目前还没有可靠的新生细胞培养方法，这阻碍了多能性的机制研究和转基因工具的开发。我们报告了新胚细胞培养和外源mRNAs传递的可靠方法。我们确定了在体外短期维持新生成骨细胞的最佳培养液，并通过移植表明培养的干细胞保持了两天的多能性。我们开发了一种方法，通过修改标准的流式细胞术方法，显著提高了新生细胞的产量和纯度。这些方法使外源mRNAs能够在新生细胞中导入和表达，克服了阻碍转基因技术在行星动物中应用的关键障碍。本文报道的细胞培养方面的进展为脊椎动物成体干细胞多能性的机制研究创造了新的机会，并为在其他新兴研究生物中开发细胞培养技术提供了系统的框架。在优化的培养条件下可以保持脊椎动物新生细胞的多能性SiR新生细胞作为可移植新生细胞的替代来源培养的SiR新生细胞提供了一种系统的检测转基因工具用于蓝藻的转基因工具在体外生物科学；分子生物学；干细胞研究中外源mRNA可在SiR新生母细胞的分化中表达
Planarians possess naturally occurring pluripotent adult somatic stem cells (neoblasts) required for homeostasis and whole-body regeneration. However, no reliable neoblast culture methods are currently available, hindering mechanistic studies of pluripotency and the development of transgenic tools. We report robust methods for neoblast culture and delivery of exogenous mRNAs. We identify optimal culture media for the short-term maintenance of neoblasts in vitro and show via transplantation that cultured stem cells retain pluripotency for two days. We developed a procedure that significantly improves neoblast yield and purity by modifying standard flow cytometry methods. These methods enable the introduction and expression of exogenous mRNAs in neoblasts, overcoming a key hurdle impeding the application of transgenics in planarians. The advances in cell culture reported here create new opportunities for mechanistic studies of planarian adult stem cell pluripotency, and provide a systematic framework to develop cell culture techniques in other emerging research organisms. Planarian neoblast pluripotency can be maintained in optimized culture conditions SiRNeoblasts serve as an alternative source of transplantable neoblasts Cultured SiRNeoblasts provide a system to examine transgene tools for planarians Exogenous mRNA can be expressed in differentiating SiRNeoblasts in vitro Biological sciences; Molecular biology; Stem cells research
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影响因子：
16.2
作者：
Christensen, M;Estevez, A;Strange, K
通讯作者：
Strange, K
影响因子：
16.6
作者：
Lukinavičius G;Blaukopf C;Pershagen E;Schena A;Reymond L;Derivery E;Gonzalez-Gaitan M;D'Este E;Hell SW;Wolfram Gerlich D;Johnsson K
通讯作者：
Johnsson K
影响因子：
64.8
作者：
ROBERTSON, E;BRADLEY, A;EVANS, M
通讯作者：
EVANS, M
影响因子：
11.4
作者：
FIRE, A
通讯作者：
FIRE, A
DOI：
10.1073/pnas.71.4.1250
发表时间：
1974-01-01
影响因子：
11.1
作者：
JAENISCH, R;MINTZ, B
通讯作者：
MINTZ, B