Use of cation exchange chromatography for human C-peptide isotope dilution - mass spectrometric assay.
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DOI：
10.1016/j.chroma.2011.10.080
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发表时间：
2011-12-23
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Little RR
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Stoyanov AV;Rohlfing CL;Connolly S;Roberts ML;Nauser CL;Little RR
本文介绍了离子交换色谱法在c肽分析中的应用。在c肽分离阶段，使用强阳离子交换剂（SP - HP或MonoS）从压舱蛋白和肽中纯化分析物。通过建立肽的净表面电荷随ph值变化的理论模型，优化了离子交换色谱分离的条件。纯化后的样品进一步进行LC-MS/MS。为了提高分析的可靠性，同时对天然c肽和内标c肽类似物（m/z分别为927.7和147.2的片段）的两个片段离子进行监测。与目前使用的固相萃取方法相比，使用离子交换色谱法可以处理更大的样本量，这对于检测C肽水平非常低的患者很重要。
An application of ion exchange chromatography for C-peptide analysis is described here. At the stage of C-peptide isolation, a strong cation exchanger (SP HP or MonoS) was used to purify the analyte from ballast proteins and peptides. The conditions of ion-exchange chromatographic separations were optimized using theoretical modeling of the net surface electric charge of the peptide as a function of pH. The purified and concentrated sample was further subjected to LC-MS/MS. In order to improve the reliability of analysis, two fragment ions were monitored simultaneously both for native C-peptide and internal standard, isotopically labeled C-peptides analogues (fragments with m/z of 927.7 and 147.2). Using ion-exchange chromatography, it became possible to process larger sample volumes, important for testing patients with very low C peptide levels, compared to currently used solid phase extraction methods.
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