Aminoluciferins extend firefly luciferase bioluminescence into the near-infrared and can be preferred substrates over D-luciferin.
Aminoluciferins extend firefly luciferase bioluminescence into the near-infrared and can be preferred substrates over D-luciferin.
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DOI：
10.1021/ja505795s
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发表时间：
2014-09-24
影响因子：
15
通讯作者：
Miller, Stephen C.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Mofford, David M.;Reddy, Gadarla Randheer;Miller, Stephen C.
萤火虫荧光素酶腺苷酸化并氧化 d-荧光素以化学方式产生可见光，广泛用于生物测定和成像。在这里，我们表明荧光素酶和荧光素都可以重新设计以扩展这种发光反应的范围。 d-荧光素可以被合成荧光素类似物替代，在表达活荧光素酶的细胞中，其近红外光子通量比 d-荧光素增加 10 倍以上。萤火虫荧光素酶可以突变以接受和利用在活细胞和裂解细胞中均具有高活性的刚性氨基荧光素，同时表现出比天然荧光素酶底物高 10 000 倍的选择性。因此，这些新的荧光素类似物为生物发光报告基因的大家族铺平了道路。
Firefly luciferase adenylates and oxidizes d-luciferin to chemically generate visible light and is widely used for biological assays and imaging. Here we show that both luciferase and luciferin can be reengineered to extend the scope of this light-emitting reaction. d-Luciferin can be replaced by synthetic luciferin analogues that increase near-infrared photon flux >10-fold over that of d-luciferin in live luciferase-expressing cells. Firefly luciferase can be mutated to accept and utilize rigid aminoluciferins with high activity in both live and lysed cells yet exhibit 10 000-fold selectivity over the natural luciferase substrate. These new luciferin analogues thus pave the way to an extended family of bioluminescent reporters.
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影响因子：
15
作者：
Reddy, Gadarla Randheer;Thompson, Walter C.;Miller, Stephen C.
通讯作者：
Miller, Stephen C.
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作者：
Woodroofe, Carolyn C.;Meisenheimer, Poncho L.;Branchini, Bruce R.
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Branchini, Bruce R.
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作者：
Belov, Vladimir N.;Bossi, Mariano L.;Hell, Stefan W.
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Hell, Stefan W.
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Conley, Nicholas R.;Dragulescu-Andrasi, Anca;Rao, Jianghong;Moerner, W. E.
通讯作者：
Moerner, W. E.
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作者：
Panchuk-Voloshina, N;Haugland, RP;Haugland, RP
通讯作者：
Haugland, RP