Nanoparticle encapsidation of Flock house virus by auto assembly of Tobacco mosaic virus coat protein.
Nanoparticle encapsidation of Flock house virus by auto assembly of Tobacco mosaic virus coat protein.
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DOI：
10.3390/ijms151018540
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发表时间：
2014-10-14
影响因子：
5.6
通讯作者：
McCormick AA
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Maharaj PD;Mallajosyula JK;Lee G;Thi P;Zhou Y;Kearney CM;McCormick AA
烟草花叶病毒 (TMV) 外壳蛋白以其自组装成超分子纳米颗粒的能力而闻名，这些纳米颗粒可以是源自约 300 bp 基因组 RNA 组装起点 (OA) 的蛋白盘或棒。我们利用 TMV 自组装特性创建了一种新型 Flock House 病毒 (FHV) RNA 纳米颗粒。 FHV 编码支持 FHV 基因组自主复制的病毒聚合酶，这使其成为病毒转基因表达研究和靶向 RNA 递送至宿主细胞的有吸引力的候选者。然而，FHV 病毒基因组大小受到天然 FHV 衣壳的严格限制。为了确定是否可以消除这种包装限制，对 FHV 进行了改造以表达增强型绿色荧光蛋白 (GFP)，以监测功能性 FHV RNA 活性。然后将 TMV OA 引入 6 个 3' 插入位点，其中只有第一个位点支持功能性 FHV GFP 表达。为了制造纳米颗粒，将 FHV GFP-OA 修饰的基因组 RNA 在体外与 TMV 外壳蛋白混合，并通过琼脂糖电泳和电子显微镜监测衣壳化情况。类TMV棒状纳米粒子的产生表明修饰的FHV RNA可以通过自组装被纯化的TMV外壳蛋白包裹。这是通过蛋白质自组装对 FHV 基因组进行复制独立包装的首次演示。
Tobacco Mosaic virus (TMV) coat protein is well known for its ability to self-assemble into supramolecular nanoparticles, either as protein discs or as rods originating from the ~300 bp genomic RNA origin-of-assembly (OA). We have utilized TMV self-assembly characteristics to create a novel Flock House virus (FHV) RNA nanoparticle. FHV encodes a viral polymerase supporting autonomous replication of the FHV genome, which makes it an attractive candidate for viral transgene expression studies and targeted RNA delivery into host cells. However, FHV viral genome size is strictly limited by native FHV capsid. To determine if this packaging restriction could be eliminated, FHV was adapted to express enhanced green fluorescent protein (GFP), to allow for monitoring of functional FHV RNA activity. Then TMV OA was introduced in six 3' insertion sites, with only site one supporting functional FHV GFP expression. To create nanoparticles, FHV GFP-OA modified genomic RNA was mixed in vitro with TMV coat protein and monitored for encapsidation by agarose electrophoresis and electron microscopy. The production of TMV-like rod shaped nanoparticles indicated that modified FHV RNA can be encapsidated by purified TMV coat protein by self-assembly. This is the first demonstration of replication-independent packaging of the FHV genome by protein self-assembly.
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影响因子：
3.7
作者：
Kim JH;Lee SR;Li LH;Park HJ;Park JH;Lee KY;Kim MK;Shin BA;Choi SY
通讯作者：
Choi SY
DOI：
10.1073/pnas.081288198
发表时间：
2001-04-24
影响因子：
11.1
作者：
Dasgupta, R;Garcia, BH;Goodman, RM
通讯作者：
Goodman, RM
影响因子：
5.4
作者：
BALL, LA;LI, Y
通讯作者：
LI, Y
影响因子：
2.7
作者：
SCOTTI, PD;DEARING, S;MOSSOP, DW
通讯作者：
MOSSOP, DW
影响因子：
56.9
作者：
Li, HW;Li, WX;Ding, SW
通讯作者：
Ding, SW