Efficient genome engineering of Toxoplasma gondii using CRISPR/Cas9.
Efficient genome engineering of Toxoplasma gondii using CRISPR/Cas9.
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DOI：
10.1371/journal.pone.0100450
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发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Lourido S
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Sidik SM;Hackett CG;Tran F;Westwood NJ;Lourido S
刚地弓形虫是人类和动物的寄生虫，并且是包括疟原虫属的其它顶复门的模型，疟疾的病原体尽管取得了许多进展，操纵T。弓形虫基因组仍然是劳动密集型的，并且通常限于实验室适应的菌株或携带能够选择的突变的品系。在这里，我们使用RNA引导的Cas9核酸酶在没有选择的情况下有效地产生敲除，并将点突变和表位标签引入T.弓形虫基因组这些方法将简化寄生虫基因的功能分析，并使其基因组的高通量工程。
Toxoplasma gondii is a parasite of humans and animals, and a model for other apicomplexans including Plasmodium spp., the causative agents of malaria. Despite many advances, manipulating the T. gondii genome remains labor intensive, and is often restricted to lab-adapted strains or lines carrying mutations that enable selection. Here, we use the RNA-guided Cas9 nuclease to efficiently generate knockouts without selection, and to introduce point mutations and epitope tags into the T. gondii genome. These methods will streamline the functional analysis of parasite genes and enable high-throughput engineering of their genomes.
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