Fluorescence detection of MMP-9. I. MMP-9 selectively cleaves Lys-Gly-Pro-Arg-Ser-Leu-Ser-Gly-Lys peptide.
Fluorescence detection of MMP-9. I. MMP-9 selectively cleaves Lys-Gly-Pro-Arg-Ser-Leu-Ser-Gly-Lys peptide.
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DOI：
10.2174/138920111795470967
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发表时间：
2011-05
影响因子：
2.8
通讯作者：
Gryczynski I
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Fudala R;Ranjan AP;Mukerjee A;Vishwanatha JK;Gryczynski Z;Borejdo J;Sarkar P;Gryczynski I
MMP-9酶识别肽序列Lys-Gly-Pro-Arg-Ser-Leu-Ser-Gly-Lys并将肽切割成两部分。我们合成了一个由5-FAM和Cy5染料组成的双荧光团信标。由于Förster共振能量转移（Resonance Energy Transfer， FRET）的作用，荧光素部分的荧光发射被Cy5分子显著猝灭，而Cy5的荧光被强烈增强。添加MMP-9酶后，5-FAM荧光增强，Cy5荧光减弱。对照MMP-2酶不会引起5-FAM或Cy5荧光的任何变化。我们相信我们的观察将有助于在疾病条件下早期发现MMP-9水平升高。
MMP-9 enzyme recognizes a peptide sequence Lys-Gly-Pro-Arg-Ser-Leu-Ser-Gly-Lys and cleaves the peptide into two parts. We synthesized a dual fluorophore beacon consisting of 5-FAM and Cy5 dyes. The fluorescence emission of the fluorescein moiety is dramatically quenched by Cy5 molecule due to Förster Resonance Energy Transfer (FRET) and the fluorescence of Cy5 is strongly enhanced. Upon addition of MMP-9 enzyme, the fluorescence of 5-FAM intensifies and Cy5 decreases. The control MMP-2 enzyme does not cause any changes in either 5-FAM or Cy5 fluorescence. We believe that our observation will help in early detection of elevated MMP-9 levels under disease conditions.
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