Single-Protein Identification by Simultaneous Size and Charge Imaging Using Evanescent Scattering Microscopy.
Single-Protein Identification by Simultaneous Size and Charge Imaging Using Evanescent Scattering Microscopy.
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DOI：
10.1021/acssensors.2c01008
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发表时间：
2022-09-23
期刊：
影响因子：
8.9
通讯作者：
Wang, Shaopeng
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Wan, Zijian;Ma, Guangzhong;Zhang, Pengfei;Wang, Shaopeng
关键词：
分离和鉴定不同的蛋白质是生物化学中最基本的任务之一，通常是通过电泳和western blot来实现的。然而，在小样本量下进行这样的分析是具有挑战性的。使用类似于这些传统方法的原理，我们提出了一种无标记的单分子技术，可以根据蛋白质的大小、电荷和抗体结合的差异来识别不同的蛋白质。我们用柔性聚合物将单个蛋白质分子系在传感器表面，并通过施加交变电场驱动它们振荡。通过高分辨率散射显微镜跟踪每个蛋白质分子的纳米级振荡，可以同时确定每个蛋白质分子的大小和电荷。我们还研究了不同缓冲液pH值和抗体结合引起的变化，这使我们能够进一步扩大分离能力，并在混合物中识别两种不同的蛋白质。我们期望我们的技术将有助于单蛋白分析和生物传感。
Separation and identification of different proteins is one of the most fundamental tasks in biochemistry that is typically achieved by electrophoresis and western blot. Yet, it is challenging to perform such analysis with small sample size. Using a principle analogous to these conventional approaches, we present a label-free, single-molecule technique to identify different proteins based on the difference in their size, charge, and antibody binding. We tether single protein molecules to a sensor surface with a flexible polymer and drive them into oscillation by applying an alternating electric field. By tracking the nanometer-scale oscillation of each protein molecule via a high-resolution scattering microscopy, the size and charge of each protein molecule can be determined simultaneously. Changes induced by varying the buffer pH and antibody binding are also investigated, which allows us to further expand the separation ability and identify two different proteins in a mixture. We anticipate our technique will contribute to single protein analysis and biosensing.
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影响因子：
16.6
作者：
Li, Meng;Yuan, Tinglian;Wang, Wei
通讯作者：
Wang, Wei
影响因子：
3.4
作者：
Miyazaki, Jun;Toumon, Yasunobu
通讯作者：
Toumon, Yasunobu
DOI：
10.1038/nrd.2016.230
发表时间：
2017-01
期刊：
Nature reviews. Drug discovery
影响因子：
--
作者：
Santos R;Ursu O;Gaulton A;Bento AP;Donadi RS;Bologa CG;Karlsson A;Al-Lazikani B;Hersey A;Oprea TI;Overington JP
通讯作者：
Overington JP
影响因子：
16.6
作者：
Ma G;Wan Z;Yang Y;Zhang P;Wang S;Tao N
通讯作者：
Tao N
利用自组装纳米振荡器实时监测磷酸化动力学
影响因子：
16.6
作者：
Fang, Yimin;Chen, Shan;Tao, Nongjian
通讯作者：
Tao, Nongjian