Utilizing chemically induced dimerization of FKBP to analyze endocytosis by live-cell imaging in budding yeast.
Utilizing chemically induced dimerization of FKBP to analyze endocytosis by live-cell imaging in budding yeast.
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利用化学诱导的FKBP二聚体通过活细胞成像分析芽期酵母的内吞作用。
DOI：
10.1016/j.xpro.2022.101323
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发表时间：
2022-06-17
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Di Pietro, Santiago M.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Lamb, Andrew K.;Di Pietro, Santiago M.
化学诱导的二聚化（CID）是人工诱导蛋白质-蛋白质相互作用的有用工具。虽然CID已被广泛用于哺乳动物系统中的活细胞显微镜应用，但很少用于酵母细胞生物学研究。在这里，我们提出了一个逐步的协议，利用CID系统在活细胞显微镜实验芽殖酵母胞吞作用。在专注于内吞作用研究的同时，该协议框架也适用于酿酒酵母中其他细胞过程的研究。有关本方案使用和执行的完整详细信息，请参阅。用于内源性表达FKBP标记的蛋白质的酵母菌株的产生利用酿酒酵母中的诱导型同源二聚化系统网格蛋白介导的内吞作用的荧光显微镜成像化学诱导二聚化（CID）是人工诱导蛋白质-蛋白质相互作用的有用工具。虽然CID已被广泛用于哺乳动物系统中的活细胞显微镜应用，但很少用于酵母细胞生物学研究。在这里，我们提出了一个逐步的协议，利用CID系统在活细胞显微镜实验芽殖酵母胞吞作用。在专注于内吞作用研究的同时，该协议框架也适用于酿酒酵母中其他细胞过程的研究。
Chemically induced dimerization (CID) is a useful tool for artificially inducing protein-protein interactions. Although CID has been used extensively for live-cell microscopy applications in mammalian systems, it is rarely utilized in yeast cell biology studies. Here, we present a step-by-step protocol for the utilization of a CID system in live-cell microscopy experiments of budding yeast endocytosis. While focusing on the study of endocytosis, this protocol framework is adaptable to the study of other cellular processes in Saccharomyces cerevisiae. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to. Generation of yeast strains for endogenous expression of FKBP-tagged proteins Utilization of an inducible homodimerization system in S. cerevisiae Fluorescence microscopy imaging of clathrin-mediated endocytosis Chemically induced dimerization (CID) is a useful tool for artificially inducing protein-protein interactions. Although CID has been used extensively for live-cell microscopy applications in mammalian systems, it is rarely utilized in yeast cell biology studies. Here, we present a step-by-step protocol for the utilization of a CID system in live-cell microscopy experiments of budding yeast endocytosis. While focusing on the study of endocytosis, this protocol framework is adaptable to the study of other cellular processes in Saccharomyces cerevisiae.
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影响因子：
64.5
作者：
Kaksonen, M;Toret, CP;Drubin, DG
通讯作者：
Drubin, DG
DOI：
10.1083/jcb.202002160
发表时间：
2020-11-02
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Pedersen RTA;Hassinger JE;Marchando P;Drubin DG
通讯作者：
Drubin DG
影响因子：
3.2
作者：
ITO, H;FUKUDA, Y;KIMURA, A
通讯作者：
KIMURA, A
影响因子：
3.3
作者：
Lamb AK;Fernandez AN;Peersen OB;Di Pietro SM
通讯作者：
Di Pietro SM
影响因子：
19
作者：
Weinberg, Jasper;Drubin, David G.
通讯作者：
Drubin, David G.