A multicolor panel of TALE-KRAB based transcriptional repressor vectors enabling knockdown of multiple gene targets.
A multicolor panel of TALE-KRAB based transcriptional repressor vectors enabling knockdown of multiple gene targets.
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DOI：
10.1038/srep07338
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发表时间：
2014-12-05
影响因子：
4.6
通讯作者：
Wu WS
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Zhang Z;Wu E;Qian Z;Wu WS
多个基因靶标的稳定有效的敲低对于分子途径的剖析是非常需要的。由于转录激活因子样效应器 (TALE) 允许序列特异性 DNA 结合，因此它提供了一种新的遗传扰动技术，可实现基因特异性抑制。在这里，我们构建了一个多色慢病毒 TALE-Kruppel 相关盒 (KRAB) 表达载体平台，能够敲低多个基因靶标。该平台与 Golden Gate TALEN 和 TAL 效应器套件 2.0 完全兼容，这是一种广泛使用的高效 TALE 组装方法。我们发现，这种多色 TALE-KRAB 载体系统与骨髓移植相结合，可以快速敲除受体小鼠造血干细胞和祖细胞中的 c-kit 和 PU.1 基因。此外，我们的数据表明，该平台同时敲低相同原代细胞群中的 c-Kit 和 PU.1 基因。总之，我们的结果表明，这种多色 TALE-KRAB 载体平台是一种有前景的多功能工具，可用于敲除多个基因靶标，并且可以极大地促进分子途径的剖析。
Stable and efficient knockdown of multiple gene targets is highly desirable for dissection of molecular pathways. Because it allows sequence-specific DNA binding, transcription activator-like effector (TALE) offers a new genetic perturbation technique that allows for gene-specific repression. Here, we constructed a multicolor lentiviral TALE-Kruppel-associated box (KRAB) expression vector platform that enables knockdown of multiple gene targets. This platform is fully compatible with the Golden Gate TALEN and TAL Effector Kit 2.0, a widely used and efficient method for TALE assembly. We showed that this multicolor TALE-KRAB vector system when combined together with bone marrow transplantation could quickly knock down c-kit and PU.1 genes in hematopoietic stem and progenitor cells of recipient mice. Furthermore, our data demonstrated that this platform simultaneously knocked down both c-Kit and PU.1 genes in the same primary cell populations. Together, our results suggest that this multicolor TALE-KRAB vector platform is a promising and versatile tool for knockdown of multiple gene targets and could greatly facilitate dissection of molecular pathways.
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使用工程 TALE 和 Cas9 转录因子直接激活人类和小鼠 Oct4 基因。
影响因子：
14.9
作者：
Hu J;Lei Y;Wong WK;Liu S;Lee KC;He X;You W;Zhou R;Guo JT;Chen X;Peng X;Sun H;Huang H;Zhao H;Feng B
通讯作者：
Feng B
影响因子：
14.9
作者：
Lin, XY;Ruan, X;Anderson, MG;McDowell, JA;Kroeger, PE;Fesik, SW;Shen, Y
通讯作者：
Shen, Y
影响因子：
64.5
作者：
Kiel, MJ;Yilmaz, ÖH;Morrison, SJ
通讯作者：
Morrison, SJ
影响因子：
56.9
作者：
Boch, Jens;Scholze, Heidi;Bonas, Ulla
通讯作者：
Bonas, Ulla
DOI：
10.1126/science.1232033
发表时间：
2013-02-15
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Mali P;Yang L;Esvelt KM;Aach J;Guell M;DiCarlo JE;Norville JE;Church GM
通讯作者：
Church GM