Regulation of Transferrin Receptor mRNA in HL-60 Cells
HL-60 细胞中转铁蛋白受体 mRNA 的调节
基本信息
- 批准号:8707336
- 负责人:
- 金额:$ 5.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:Standard Grant
- 财政年份:1988
- 资助国家:美国
- 起止时间:1988-05-15 至 1990-10-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
The transferrin receptor is the cell surface protein responsible for iron transport into mammalian cells. In this study the regulation of the transferrin receptor at the mRNA level will be studied. A myeloid cell line, HL-60, will be used as a model system. Transferrin receptor levels are known to be sensitive to differentiation, exogenous concentrations of non- transferrin iron and iron chelators. It has been hypothesized that receptor levels fluctuate during the cell cycle. A cDNA probe for the receptor will be used to measure the levels of mRNA. The size of the mRNA will be determined by Northern analysis. Transcriptional activity and the stability of mRNA will also be analyzed. These methods will be used to evaluate the level at which transferrin receptor mRNA is controlled when HL-60 cells are induced to differentiate along a monocytic pathway (with 12-0-tetradecanoyl phorbol-13-acetate) or along a granulocytic pathway (with dimethyl sulfoxide). The effects of externally added iron sources and iron chelators on the regulation of transferrin receptor mRNA levels and on the intracellular iron pools will also be measured, and the relationship between cell cycle phase and transferrin receptor mRNA levels and synthesis will be determined. This is a Research Opportunities for Women Career Advancement Award. This award will permit Dr. Enns to extend her studies of the control of cellular transferrin uptake to the level of receptor gene expression by enabling her to gain experience in techniques of molecular genetics.
转铁蛋白受体是细胞表面蛋白 负责将铁转运到哺乳动物细胞中。 在这 研究转铁蛋白受体在mRNA水平的调控 水平将被研究。 将使用骨髓细胞系HL-60 作为一个模型系统。 已知转铁蛋白受体水平 敏感的分化,外源浓度的非 转铁蛋白铁和铁螯合剂。 已经假设 受体水平在细胞周期中波动。 的cDNA 受体的探针将用于测量 mRNA。 mRNA的大小将通过北方PCR来确定。 分析. 转录活性和mRNA的稳定性 也将进行分析。 这些方法将用于评估 转铁蛋白受体mRNA的水平受到控制时, HL-60细胞被诱导沿着单核细胞 途径(用12-0-十四酰基佛波醇-13-乙酸酯)或沿沿着a 粒细胞途径(用二甲基亚砜)。 的影响 外部添加的铁源和铁螯合剂, 转铁蛋白受体mRNA水平的调节, 还将测量细胞内铁库, 细胞周期时相与转铁蛋白受体的关系 将测定mRNA水平和合成。 这是一个女性职业的研究机会 进步奖。 这个奖项将允许恩斯博士 她的研究控制细胞转铁蛋白摄取, 受体基因表达水平,使她能够获得 分子遗传学技术经验。
项目成果
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