Molecular Mechanism of Regulation of the Protein Kinase C-related Kinase 2 (PRK2)

蛋白激酶PRK 2和激活的蛋白激酶PDK 1相互作用的分子机制是调节蛋白激酶PRK 2和激活的蛋白激酶PDK 1相互作用的分子机制。近几年来，我们通过激活的激酶PDK 1的介导作用和生物化学特性，研究了AGC-Kinasen的调控机制。Die für diese Interaktion entscheidende Bindungsstelle in PDK 1 wird“PIF Bindungstasche”genannt.我们不需要处理PDK 1与底物之间相互作用的分子细节。PRK在前列腺癌（PRK 1和PKN 3）和有丝分裂（PRK 2）中发挥着重要作用。PRKs是PDK 1的底物，与PDK 1中PIF结合的相互作用有利于磷酸化。目前还没有关于朝鲜和PDK 1之间相互关系的规定。在我们的研究中，我们发现PRK 2磷酸化的"旋转图案/拉链”与AGC-Kinasen的相互作用与PDK 1的调节有关。在建立PRK调节模型时，我们也发现PRK 2分子间（反式）自我抑制。我的研究是基于PRK 2和PDK 1相互作用的机制，它具有韦尔登。PRK 2的寡聚化和激酶激活机制的改变使PRK 2突变体在体内激活。在PRK 2蛋白激酶研究中，我们发现了与PDK 1相互作用的最大亲和力，韦尔登将在此基础上研究PRK 2蛋白的表达、表达和与PDK 1的相互作用，以及PRK 2与PDK 1相互作用的分子细节。通过对PRK 1和PKN 3的异构体进行测试，发现它们的异构体具有明显的调节机制，并通过PRK 2的特性进行了研究。

Ziel des vorliegenden Forschungsvorhabens ist, den molekularen Mechanismus der Interaktion zwischen der Proteinkinase PRK2 und der aktivierenden Proteinkinase PDK1 sowie die Regulation dieser Interaktion aufzuklären. In den letzten Jahren haben wir den Mechanismus der Regulation verschiedener AGC-Kinasen durch Interaktion mit der aktivierenden Kinase PDK1 entdeckt und biochemisch charakterisiert. Die für diese Interaktion entscheidende Bindungsstelle in PDK1 wird „PIF Bindungstasche“ genannt. Kenntnisse über die molekularen Details der Interaktion von PDK1 mit Substraten sind jedoch nicht vorhanden. PRKs spielen eine wichtige Rolle beim Wachstum von Prostatakarzinomen (PRK1 und PKN3) und auch in der Mitose (PRK2). PRKs sind Substrate von PDK1 und die Interaktion mit der PIF-Bindungstasche in PDK1 ist Vorraussetzung für ihre Phosphorylierung. Die Regulation der Interaktion zwischen PRKs und PDK1 ist jedoch nicht bekannt. In unseren Vorarbeiten haben wir beobachtet, dass die „turn-motif/Zipper“-Phosphorylierung von PRK2, im Unterschied zu anderen AGC-Kinasen, die Interaktion mit PDK1 reguliert. Im Gegensatz zu gegenwärtigen Modellen der PRK-Regulation haben wir auch festgestellt, dass PRK2 intermolekular (in trans) autoinhibiert wird. Im vorliegenden Forschungsvorhaben soll der Mechanismus der Interaktion zwischen PRK2 und PDK1 näher charakterisiert werden. Weiter ist geplant die Oligomerisierung von PRK2 und deren Beteiligung am Aktivierungsmechanismus der Kinase zu charakterisieren, sowie die in vivo-Aktivität von PRK2-Mutanten zu untersuchen. Da PRK2 diejenige Proteinkinase zu sein scheint, die mit höchster Affinität mit PDK1 interagiert, werden wir basierend auf den oben genannten Untersuchungen PRK2-Protein exprimieren, aufreinigen und in Kristallisations- und Co-Kristallisationsstudien mit PDK1 einsetzen, um die molekularen Details der PRK2-Dimerisierung und Interaktion mit PDK1 zu ermitteln. Schließlich werden wir testen, ob die Isoformen PRK1 und PKN3 den gleichen grundlegenden Regulations-Mechanismus aufweisen, der durch die Untersuchungen mit PRK2 charakterisiert werden soll.