Untersuchung der Pexophagie in Pflanzen unter spezieller Berücksichtigung der Rolle des ATG1a-Kinase-Komplexes

在接下来的几年里，人们发现，在一个自噬过程中，过氧化氢在人体内的选择性存在，而且在吞噬过程中也会发生韦尔登。本文通过生物信息学和实验数据分析，研究了两种拟南芥同工酶的胞质自噬蛋白，即蛋白激酶ATG 1a和蛋白激酶ATG 13 a，以及它们在过氧化物酶基质中的活性。在Pflanzen konserviert中，食尸鬼是违法的，但与Hefen和Säugetieren和Dersartig reguliert一起被禁止。我们将在第一个研究阶段（1）用转基因烟草BY-2悬液和转基因烟草中的过氧化物酶（Peroxisomen）通过凝胶电泳蛋白（YFP）的结构标志物、酶促反应和生理生化反应来确定过氧化物酶的作用机制;（2）用过氧化物酶基质和转基因烟草中的过氧化物酶分析来确定ATG 1a的瞬时定位，（3）利用酵母双杂交系统和免疫组化技术研究了ATG 1a和ATG 13 a的相互作用;（4）研究了ATG 1a和ATG 13 a在拟南芥自噬和敲除中的作用。我们要提醒的是，这一数据显示出的是在韦尔登发生的食尸鬼现象的机制和规律。

Vor wenigen Jahren wurde anhand von Hefen gezeigt, dass Peroxisomen unter Mangelbedingungen selektiv in einem Autophagie-ähnlichen und auch als Pexophagie bezeichneten Prozess abgebaut werden. Unsere bioinformatischen und experimentellen Daten deuten darauf hin, dass zwei Arabidopsis Isoformen der sonst cytosolischen Autophagieproteine, die Proteinkinase ATG1a und seine regulatorische Untereinheit ATG13a, welche in Hefen einen aktiven Kinase-Komplex bilden, in Pflanzen in der Peroxisomenmatrix lokalisiert sind. Offensichtlich ist die Pexophagie in Pflanzen konserviert, aber verglichen mit Hefen und Säugetieren andersartig reguliert. Wir wollen im Rahmen der ersten Projektphase (1) anhand transgener Tabak BY-2 Suspensionszellen und intakter Arabidopsispflanzen, deren Peroxisomen durch das gelbe Fluoreszenzprotein (YFP) konstitutiv markiert sind, Mangel- und entwicklungsphysiologische Bedingungen sowie den Mechanismus der Pexophagie definieren, (2) die transiente Lokalisation von ATG1a in der Peroxisomenmatrix anhand transgener Arabidopsispflanzen analysieren, die eine myc-markierte Variante des ATG1a-Proteins exprimieren, (3) die postulierte Interaktion von ATG1a und ATG13a mit Hilfe des Yeast-two-Hybridsystems und unabhängig durch Immunopräzipitation untersuchen und (4) die Rolle dieser beiden Proteine in der pflanzlichen Autophagie anhand von Knock-out-Linien von Arabidopsis analysieren. Wir erwarten, dass diese Daten bedeutende Hinweise auf den Mechanismus und die Regulation der Pexophagie in Pflanzen geben werden.