Der ruminale Monocarboxylattransporter 1: seine Bedeutung für die Resorption kurzkettiger Fettsäuren und seine regulative Modulation

本研究表明，在反刍动物的血细胞膜上皮细胞中，一种单羧基转运蛋白1（MCT 1）是由乳酸、β-羟基丁酸和乙酰乙酸通过清除胞质中的质子而形成的。这种单羧基化合物可以通过上皮内吸收（SCFA），我们发现，MCT 1在代谢产物的输出中起着重要作用，也可以通过SCFA的经上皮渗透作用。Daher是Hinsicht auf die Stabilität des intrazellulären Milieus alas auch im Hinblick auf den epithelialen SCFA-Transport anzunehmen中的一种调节性MCT 1 sowohl表达的调节剂。 在该工程中，MCT 1的作用被SCFAPermeation韦尔登所取代。Regulative Einflüsse auf den MCT 1 sollen auf systemischer Ebene（Energie- bzw. Glucoseangebot），auf Substratebene（Angebot von n-Butyrat）und auf intrazellulärer Ebene（Modulation durch Peroxisomen-Emisator-aktivierte-Rezeptoren）charakterisiert韦尔登。Als Modelle für die plumen dienen kultivierte ovine Pansenepithelzellen und intakte Pansenepithelien，die von definiert vorbehandelten bzw.最后的结果是韦尔登。MCT 1-Activität unter den versuchsbedingungen zu quantifizieren，soll an den kultivierten Pansenepithelzellen der intrazelluläre pHWert mit und ohne Hemmung des MCT 1 verfolgt韦尔登。MCT 1-Activität的定量分析可将MCT 1-Abhängigen SCFA-渗透测量的Pansenepithelien erfolgt über与Epithelmembran bzw分离。用真实的实时PCR方法和蛋白质印迹法对MCT 1的mRNA进行表达。稳定免疫组织化学方法

Eigene Untersuchungen am Pansen von Schafen zeigten, dass in der blutseitigen Membran ruminaler Epithelzellen ein Monocarboxylattransporter 1 (MCT1) lokalisiert ist, der Lactat, ß-Hydroxybutyrat und Acetoacetat zusammen mit Protonen aus dem Cytosol eliminiert. Diese Monocarboxylsäuren entstehen beim intraepithelialen Abbau von kurzkettigen Fettsäuren (SCFA).Wir gehen davon aus, dass der MCT1 infolge seiner Rolle beim Metabolitenexport auch die transepitheliale Permeation von metabolisierbaren SCFA entscheidend beeinflusst. Daher ist eine regulative Modulation der Expression des MCT1 sowohl in Hinsicht auf die Stabilität des intrazellulären Milieus als auch im Hinblick auf den epithelialen SCFA-Transport anzunehmen. In dem beantragten Projekt soll zunächst die Rolle des MCT1 bei der SCFAPermeation eingegrenzt werden. Regulative Einflüsse auf den MCT1 sollen auf systemischer Ebene (Energie- bzw. Glucoseangebot), auf Substratebene (Angebot von n-Butyrat) und auf intrazellulärer Ebene (Modulation durch Peroxisomen- Proliferator-aktivierte-Rezeptoren) charakterisiert werden. Als Modelle für die Studien dienen kultivierte ovine Pansenepithelzellen und intakte Pansenepithelien, die von definiert vorbehandelten bzw. vorgefütterten Tieren gewonnen werden.Um die MCT1-Aktivität unter den verschiedenen Versuchsbedingungen zu quantifizieren, soll an den kultivierten Pansenepithelzellen der intrazelluläre pHWert mit und ohne Hemmung des MCT1 verfolgt werden. Die Quantifizierung der MCT1-Aktivität an den isolierten Pansenepithelien erfolgt über die Messung der MCT1-abhängigen SCFA-Permeation über die Epithelmembran bzw. das gesamte Epithel.Auf mRNA-Ebene wird der Expressionsspiegel des MCT1 mit Hilfe von Real- Time-PCR ermittelt und auf Proteinebene über Western-Blots bzw. etablierte immunhistochemische Methoden.